目的：本研究利用多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠模型，通过观察转化生长因子α（TGF-α）及其受体（表皮生长因子受体，EGFR）在多囊卵巢及正常卵巢中的表达、测量PCOS及正常大鼠血清中TGF-α的水平，探讨全身与局部之间的联系以及PCOS与正常大鼠间的不同，综合判断TGF-α及其受体在PCOS发病中的作用，从整体水平、细胞水平综合分析局部调节因子在PCOS卵泡发育失败中的作用。 材料与方法：选24日龄未成年雌性SD大鼠60只，随机分成两组，每组30只。其中一组建立PCOS模型作为实验组。两组大鼠均于36日龄断头处死，取血，2000r／min离心20min，收集血清样品，测定TGF-α水平。取出双侧卵巢，每组各留三只卵巢以4％戊二醛固定行透射电镜检查。其余每只卵巢均以10％福尔马林固定，做成石蜡包块测定TGF-α及EGFR的表达。 血清TGF-α的水平用放免（RIA）测定，抗体为兔抗人TGF-α蛋白的多克隆抗体（北京华英生物技术研究所产品），用¹²⁵I标记，灵敏度及特异性较高。卵巢中TGF-α及EGFR的表达用免疫组化（IH）方法测定，TGF-α免疫组化的一抗是小鼠抗人TGF-α蛋白抗体（美国CALBIOCHEM公司产品，即用型），EGFR免疫组化的一 中文摘要抗是兔抗人EGFR蛋白多克隆抗体(美国 SAN皿 CRUZ公司产品，稀释 1：150后应用人 免疫组化结果判断标准：同一样本至少重复染色一次，由至少两位经验丰富的专业人员独立阅片。以PBS替代一抗作为阴性对照，以细胞内出现棕黄色颗粒为阳性结果。每张切片在400倍高倍视野下随机取5个视野，计数阳性细胞数占全部细胞数的比例，染色结果按比例分为：一：阳性细胞数占10％以下：十：阳性细胞数占m刁3％；＼：阳性细胞数占33～66％；牛：阳性细胞数占的％以上。 统计学分析：RJA结果的数据用了士s表示，组间差异用 t检验；IH结果用f检验。所有数据均用 SAS软件包进行统计。Prto刀5为差别显著，Pwto．of 为差别非常显著。 结果：PCOS组血清中TGF心的水平明显低于正常对照组（尸＜00001）。两组均值：PCOS 组为13．30it4．926pg／ml，正常对照组为 32．895t8＊54pg／ml。 镜下发现PCOS大鼠卵巢泡膜－间质细胞的数量比正常大鼠增多。TGF－a和 EGFR在大鼠卵巢的颗粒细胞、泡膜细胞、间质细胞中均有染色。两组相比，PCOS组TGFa在颗粒细胞的染色明显比正常对照组弱(P t 0刀of人 而在泡膜细胞（P＝0．508）和间质细胞（P＝0刁27）中的染色强度与正常对照组无显著差异。PCOS组EGFR在颗粒细胞（P＜0．00）、泡膜细胞（Pwto．001）及间质细胞（Pwt0．00）上的染色均明显比正常对照组强。 观察发现，在PCOS组，卵泡愈大，TGFa在颗粒细 2 中文摘要 胞及泡膜细胞上的染色也愈强，与正常对照组相似。但 EGFR却与正常对照组不同，无论卵泡大小，在颗粒细胞 及泡膜细胞上均表现强染色。正常对照组卵巢中的EGFR 与TGF七类似，随卵泡的增大在颗粒细胞及泡膜细胞上的 染色也增强。 PCOS组TGF亿在颗粒细胞上几乎无染色，在泡膜细 胞上的染色亦较弱，EGFR在这两个部位上的染色却很强。 而正常对照组TGF亿及EGFR在相同部位上的染色却无 类似结果，两者染色均呈中等强度。 在PCOS组，TGF心在颗粒细胞、泡膜细胞、间质细 胞的染色强度随部位的不同而变化(颗粒细胞＜泡膜细胞 ＜间质细胞人与正常对照组不同。在正常对照组，TGF亿 在颗粒细胞、泡膜细胞上的染色强度类似，而在间质细胞 上的染色要比前两个部位强。同样，EGFR的染色在两组 间也有区别，在PCOS组EGFR在这三个部位均呈强染色， 而正常对照组颗粒细胞及泡膜细胞上EGFR的染色均弱 于间质细胞。 透射电镜下观察，①PCOS大鼠：卵泡颗粒细胞核型 不整，含多个核仁的胞核较多见；线粒体呈不同程度的肿 胀，愈接近外层的颗粒细胞中其线粒体的肿胀愈明显，晴 部分断裂甚至消失；滑面内质网减少，而扩张成池的粗面 内质网增多，脂滴亦增多，电子密度较高。泡膜细胞中线 粒体亦有不同程度的肿胀：并可见大量扩张成池的滑面内 质网和粗面内质网，内有絮状物；脂滴增多，电子密度较 高。②正常对照大鼠：卵泡颗粒细胞的细胞核规整，线粒 体较小，呈杆状，具板层状椅；可见滑面内质网及核糖体。 3 中文摘要泡膜细胞的线粒体亦呈杆状，具板层状晴；少量的粗面内质网扩张成池；可见少量脂滴，呈中等电于密度。 结论：1．本研究首次发现：①PCOS大鼠血清中TGF咀的水平 明显低于正