心血管疾病是全球致人死亡的最大原因,每年死于心血管疾病的人数多于任何其它死因。据WHO估算每年约有1800万人死于心血管疾病,而其中约有740万人是死于冠心病,约占占全球死亡总数的13%。因心血管疾病致死的多发生于低收入和中等收入国家,其占比高达四分之三以上的。对于这些国家的家庭来说,大量的证据表明冠心病因高昂的治疗费用使他们陷入贫困,生活质量下降。对国家来说,会使其经济背负沉重负担,卫生支出巨大。因此冠心病的早期发现早期诊断就变得十分重要。牙周炎是牙周组织的感染性疾病,由菌斑微生物引起,是人类最常见的感染性疾病之一,被认为是口腔健康的“头号杀手”。其常导致牙周组织的破坏,牙龈的炎症,严重的还会出现牙槽骨的吸收以及牙齿的松动甚至脱落。第三次全国口腔健康流行病学调查资料表明,国人牙周炎的患病率约为70%-80%。国内外大量的流行病学资料显示,牙周致病菌不仅可以造成局部牙周组织结构和功能的损害,而且还可迁移到颈动脉和冠状动脉内膜,促进动脉斑块形成、发展和破裂,导致动脉粥样硬化,从而成为冠心病发生和发展的潜在危险因素。现阶段对冠心病的检测多为心电图、影像学分析或对血液中的生物标志物进行检测,有延迟性和创伤性。因此期望建立一种高效、便捷、无痛的的体外检测手段。其中口腔中的龈沟液是来自牙周组织的炎性渗出液,其中富含的细胞因子和内毒素等炎性介质已被证实与牙周炎的发生和发展密不可分,用它们作为牙周病的标志物,对牙周病的诊断和探讨发病机制及疾病发展预测发挥重要的临床意义。同时,龈沟液是直接从体液渗出的液体,其主要成分来源于血清,包含血清中的大部分成分,包括外周血中冠心病相关的炎症因子,如白介素、肿瘤坏死因子及C反应蛋白等。近年来大量临床病理与流行病学研究提示,牙周疾病与冠心病之间有潜在的关联,炎症反应是导致动脉粥样硬化形成的基础病理因素。因此,检测牙周龈沟液及外周血清中炎症因子（白介素、肿瘤坏死因子、C反应蛋白）的水平,探索其与牙周炎和冠心病的临床和生物学相关性对于有效控制感染、保存牙周组织健康、预防牙周炎及相关冠心病的发生具有重要意义。针对以上情况本论文研究使用基于双纳米金探针的多标志物检测的微阵列芯片,用于两种标志物IL-6和CRP的联合检测,优化了分析条件,主要完成以下工作内容:1、微阵列芯片的构建。玻璃芯片表面上修饰醛基,然后通过醛基与蛋白质上的裸露的氨基反应,使得抗体结合到玻璃芯片上,从而完成微阵列芯片的构建。2、双纳米金探针的制备。利用纳米金的可以直接结合蛋白质及DNA的原理（可能是电荷吸附,未定论）,在球型纳米金上修饰抗体和单链DNA,制备成纳米金检测探针,在球型纳米金上修饰另一条互补的单链DNA,制备成纳米金探针信号放大探针。3、检测原理。使用双抗夹心法来对抗原进行检测,形成抗体-抗原-纳米金探针的复合物,同时另一种纳米金探针通过DNA的杂交实现与上述复合物结合,实现信号的放大。最终在通过金染色,进行灰度信号的的分析完成检测。4、最终结果。该方法仅需15 1的抗原,在一个小时内即可完成检测,灵敏度高,检测限分别为;CRP:326 g/ml,IL-6:8g/ml。具有稳定的可重复性和良好的准确度。并且检测了临床血清样本,与商用的ELISA试剂盒的检测效果对比,基本上无差别,表明此方法也可用于临床检测。