论文部分内容阅读
目的：探讨慢性间断性缺氧(Chronic intermittent hypoxia, CIH)对帕金森病(Parkinson’s disease, PD)模型小鼠认知功能的影响。方法：44只雄性6周龄C57BL/6小鼠,随机分为对照组、百草枯(Paraquat, PQ)组、CIH组和PQ+CIH组。实验前后对小鼠体重进行测定,通过爬杆实验和自主活动计数检测小鼠行为学变化；使用Y型-电迷宫和跳台实验评价小鼠学习记忆能力；化学比色法测定小鼠海马乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase, Ach E)活力和乙酰胆碱(Acetylcholine, Ach)含量；免疫组织化学方法观察突触素(Synaptophysin, SYN)在海马的表达并测定平均灰度值；应用HE、尼氏染色和电镜分别检测小鼠海马神经元的形态、数目和超微结构的变化。结果：1、体重结果：各组小鼠间实验前体重差异无统计学意义(P>0.05)；实验终点各组间体重差异亦无统计学意义(P>0.05)。2、爬杆实验测试结果：实验前各组间差异无统计学意义(P>0.05);实验终点,和对照组比较其余3组得分均减少(P<0.05), PQ+CIH组减少最明显(P<0.01)；与CIH组比较,PQ组和PQ+CIH组得分减低(P<0.05);与PQ组比较,PQ+CIH组得分亦减低(P<0.05)。3、自主活动计数结果：实验前各组间差异无统计学意义(P>0.05);实验终点和对照组比较其余3组计数均减少(P<0.05), PQ+CⅢ(?)(?)减少最明显(P<0.01)；与CIH组比较,PQ组和PQ+CIH组计数明显减少(P<0.05),与PQ组比较,PQ+CIH组计数明显减少(P<0.05)。4、电迷宫测试：对照组、PQ组、CIH组和PQ+CIH组电迷宫学习总反应时间(Total reaction time, TRT)分别为：68.73±11.63、79.37±7.16、81.46±10.29、97.27±11.49；错误反应次数(Error number, EN)分别为：2.45±1.51、4.09±1.87、4.18±0.98、5.55±1.03。记忆TRT分别为：59.27±7.19、73.36±6.56、76.55±8.93、96.64±13.10;EN分别为：1.73±1.01、3.09±1.14、3.55±1.37、5.36±1.29。与对照组相比,其余3组学习记忆成绩均下降(P<0.05),其中PQ+CIH组下降最明显(P<0.01);PQ组和CIH组与PQ+CIH组相比亦有差异(P<0.05),而PQ组和CIH组差异无统计学意义(P>0.05)。5、跳台实验测试：各组跳台实验学习反应时间(Reaction time, RT)分别为：3.09±0.70、4.45±1.50、4.64±1.36、6.09±1.81；EN分别为：2.64±0.81、3.73±0.90、3.84±1.39、5.09±1.51。记忆RT分别为：3.00±1.00、4.18±1.54、4.29±1.55、5.64±1.12：EN分别为：2.45±0.93、3.82±0.87、4.00±1.84、5.45±1.92。与对照组相比,其余3组学习记忆成绩均下降(P<0.05),其中PQ+CIH组下降最明显(P<0.01);PQ组和CIH组与PQ+CIH组相比亦有差异(P<0.05),而PQ组和CIH组差异无统计学意义(P>0.05)。6、海马Ach E活性和Ach含量结果：各组海马Ach E活性分别为：7.62+0.53、7.63±0.45、7.20+0.49、8.04±0.37,Ach含量分别为：2.95±0.17、2.92±0.14、2.73±0.26、3.13±0.17。与对照组相比,其余3组活性和含量均下降(P<0.05),其中PQ+CIH组下降最明显(P<0.01);PQ组和CIH组与PQ+CIH组相比亦有差异(P<0.05),而PQ组和CIH组差异无统计学意义(P>0.05)。7、海马SYN灰度值结果：各组海马SYN灰度值分别为：129.61±1.84、132.39±2.96、132.58±3.08、135.08±2.62。与对照组相比,其余3组均下降(P<0.05),其中PQ+CIH组下降最明显(P<0.01);PQ组和CIH组与PQ+CIH组相比亦有差异(P<0.05),而PQ组和CIH组差异无统计学意义(P>0.05)。8、海马神经元HE和Nissl染色结果：HE染色见对照组海马神经元分布均匀,细胞核结构排列整齐,密集,其余3组均见胞核排列紊乱,间质水肿,其中PQ+CIH组最明显,部分神经元结构崩解、消失。Nissl染色见对照组海马神经元排列整齐,尼氏体清晰,其余3组尼氏体染色浅,尼氏体减少,其中CIH+PQ组尼氏体减少最明显。各组细胞计数分别为:264.91±12.77;239.73±14.79、244.73±13.35、225.36±11.41。与对照组相比,其余3组尼氏染色细胞计数均下降(P<0.05),其中PQ+CIH组下降最明显(P<0.01),而PQ组和CIH组差异无统计学意义(P>0.05)。9、海马神经元电镜结果：对照组细胞器丰富,染色质均匀,核仁清楚,PQ组和CIH组细胞器数量减少,胞核呈不规则形,CIH+PQ组溶酶体颗粒增多,胞核呈扭曲形。结论：CIH加重了PQ所致PD模型小鼠认知功能下降程度,可能与海马Ach含量下降、突触功能减退及海马神经元结构改变有关。