醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤抑制作用的实验研究

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[目的]研究醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤的治疗作用,并初步探讨醋酸棉酚对头颈鳞癌的抑制作用及其机制,为临床治疗相关肿瘤提供一种新途径和科学理论依据。[材料与方法]1.建立动物模型。选4-6周BALB/C-nu裸鼠,将常规培养的人舌鳞癌Cal-27细胞接种于裸鼠右腋皮下,每只注射0.1ml(细胞密度3×107/ml),观察裸鼠成瘤情况,计算成瘤率。2.实验分组及药物干预。2周后将成瘤裸鼠随机分为三组(n=8),设立空白组(生理盐水0.2ml/只);DMSO组(0.2%的DMSO0.2ml/只);醋酸棉酚GAA组(0.2% DMSO助溶的GAA 15mg/kg)。给药方式均为腹腔注射,1次/2天,共6次。3.药物治疗作用观察。记录裸鼠体重及移植瘤变化情况,绘制肿瘤生长曲线。最后一次给药2天后处死裸鼠,剥离瘤体组织及其主要脏器,称量肿瘤质量计算抑瘤率。4.制作石蜡切片。HE染色观察各组肿瘤组织病理变化及其主要脏器是否有癌细胞转移,TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡率。5.免疫组化行CD31检测,统计各组肿瘤中MVD值的结果。[结果]1.成功建立人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤动物模型,成瘤率为96%。2.裸鼠体重及移植瘤体积变化:空白组裸鼠质量最重;DMSO组次之;GAA组裸鼠质量最轻。空白组和DMSO组体重变化无显著差异(P>0.05),GAA组与其余两组之间体重变化均有显著差异(P<0.05)。GAA组移植瘤体积在药物干预后变化明显,瘤体增长速度缓慢,移植瘤体积明显小于空白组及DMSO组,与空白组及DMSO组比较具有显著性差异(P<0.05)3.抑瘤率情况:空白组肿瘤,其平均瘤重为(1.835±0.293)g,抑瘤率为0%;DMSO组肿瘤,平均瘤重(1.764±0.184)g,抑瘤率(3.87±3.7)%;GAA组肿瘤,平均瘤重(0.839±0.091)g,抑瘤率(54.28±6.9)%。GAA组与其余两组(空白组和DMSO组)比较,抑瘤率存在显著性差异(P<0.05)。4,HE染色示:空白组,细胞排列最紧密,血管数最多,核大深染;DMSO组,细胞排列疏松,血管数较少,间质较多,核深染;GAA组,细胞异型性不明显,呈巢状、索条状排列,肿瘤血管最少。三组裸鼠主要脏器均未发现鳞癌细胞转移。5.TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡率:空白组凋亡率为(21.144-10.01)%;DMSO组(23.80±4.45)%;GAA组(96.16±2.80)%。空白组与DMSO组比较无显著性差异(P>0.05);GAA组与其余两组分别比较有显著性差异(P<0.01)。6.各组裸鼠移植瘤MVD值结果:空白组及DMSO组MVD值高于GAA组,差异具有显著性(P<0.01);空白组与DMSO组MVD值比较差异无显著性(P>0.05)。[结论]1.成功建立人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤动物模型,成瘤率为96%。2.醋酸棉酚(GAA)对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,HE染色示:人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤模型未见鳞癌发生远处转移。3.醋酸棉酚(GAA)可促进人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤细胞凋亡。4.醋酸棉酚(GAA)抑制人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤生长可能与抑制肿瘤血管生成及降低肿瘤内微血管密度MVD值有关。
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