论文部分内容阅读
火龙果茎中含有植物性多糖、多种矿物质元素、维生素E和甾醇等物质,能调节人体机能,提高人体免疫力,美容养颜,开发前景广阔,潜在价值高,近年来在国内外受到广泛关注,但是有关火龙果茎凝胶汁的制备和多糖的提取以及火龙果茎凝胶汁和多糖生物功效方面的研究尚未见报道。本实验以新鲜火龙果茎为材料,首先研究火龙果茎凝胶汁的提取工艺,并针对降粘和脱色进行优化。结果表明,火龙果茎凝胶汁提取效果最佳的料液比为1:3,降粘的最佳条件是加入0.05%的果胶酶,45℃水浴浸提,浸提时间为60min;脱色的最佳条件是加入2%活性炭,60℃水浴脱色,脱色时间为30min。其次,对火龙果茎凝胶汁进行成分分析和生物功效的检测。结果表明,火龙果茎凝胶汁中总膳食纤维(TDF-Total Dietary Fiber)含量为728.4g/kg;不溶性膳食纤维(IDF-InsolubleDietary Fiber)含量为462.9g/kg:可溶性膳食纤维(SDF-Soluble Dietary Fiber)含量为193.3g/kg:超氧化物歧化酶(SOD-Super Oxide Dlsmutase)活力为4.416U/mL;脂肪酶活力为2.16U/g;蛋白酶活力为6.46U/mL;多糖含量为130.48ug/mL;蛋白含量为1619.17ug/mL。分别采用DPPH法、邻苯三酚法和水杨酸法测定火龙果茎凝胶汁清除自由基的功效,发现其对DPPH总自由基清除率为48.55%,对超氧阴离子自由基的清除率为13.96%,对羟自由基的清除率为59.30%;以对酪氨酸酶活性的抑制法来测定其美白功效,结果显示其对酪氨酸酶的活性抑制率为21.41%;经过人体保湿实验发现其含水率高于空白对照组,失水率低于空白对照组;通过皮肤成像系统对其进行嫩肤功效的检测发现涂抹火龙果茎凝胶汁后皮肤粗糙度有所降低;进行人体抗敏实验,通过皮肤涂抹火龙果茎凝胶汁前后对致敏剂的反应,发现其能有效舒缓皮肤的过敏症状。最后,通过正交实验来纵向和横向比较几种火龙果茎多糖的提取方法。最终确定通过微波提取的方法对火龙果茎中的植物性多糖进行提取,提取条件是微波功率200W,微波时间10min,微波温度80℃。经过冷处理法醇沉提出粗多糖(SPP),通过苯酚-硫酸法检测其总糖含量为27.85%,考马斯亮蓝染色法检测其蛋白质含量为4.61%。通过Sevage法去除粗多糖SPP中蛋白质杂质,并通过正交试验获得最佳条件:试剂配比(氯仿:正丁醇)=3:1,Sevage试剂用量(试剂/样品)=1/4,Sevage试剂取用次数3次。再经透析后冷冻干燥成粉,得到纯化后多糖。纯化后所得多糖(SPPS)为浅白色粉末,糖含量比SPP提高13.03%。将纯化后的多糖SPPS通过高效液相色谱检测其纯度,出现单一对称的峰,证实SPPS是单一火龙果茎多糖;进行元素组成分析,碳氮比由31.67提高到101.52,证明SPP纯化为SPPS后游离蛋白质和小分子杂质基本去除;经红外图谱(IR)结构鉴定,SPPS为含有乙酰化β-D-吡喃甘露聚糖的混合物;经基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分子量测定,其范围为3900～4300。分别以自由基清除率、抑制酪氨酸酶活性和体内水分含量与散失率为指标来检测纯化后多糖SPPS在抗氧化、美白和保湿方面的生物学功效,发现其在保湿方面效果显著。本论文有关火龙果茎凝胶汁的制备和多糖的提取以及火龙果茎凝胶汁和多糖的生物功效的初步研究为人们深入了解和应用火龙果茎提供了依据。