小檗碱是从毛茛科（Ranunculaceae）黄连（Coptis chinensis Franch）、三角叶黄（Coptis deltoiden C.Y.cheng et Hsiao）、云连（Coptis teeta wall）的干燥根茎中提取的一种苯并异喹啉类季铵型生物碱。长期以来对小檗碱生化、药理、临床的研究,证明它是一种没有细胞毒和致突变作用的、具有广泛用途的药物。小檗碱具有抗心律失常、抗菌、抗炎、抗疟和抗脑缺血等活性。近来,吴俊芳等报道小檗碱对小鼠和大鼠脑缺血有保护作用,刘国林等报道其可改善痴呆高危人群的认知功能。阿尔茨海默病（AD）是一种最为常见的神经退行性疾病。一些研究已证明氧化应激和β-淀粉样蛋白（Aβ）在AD的发生发展中扮演着重要角色。本研究采用形态学、生物化学、分子生物学和钙影像等方法,研究小檗碱对过氧化氢（H₂O₂）和Aβ诱导培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞损伤的作用及其机制,在细胞水平探讨小檗碱神经保护作用的机制,为其应用于神经退行性疾病提供实验依据,为AD中药防治研究提供理论依据。1.小檗碱对H₂O₂诱导PC12细胞损伤的作用及其机制本研究采用H₂O₂（150μM）处理细胞6小时制造细胞损伤模型,应用细胞增殖抑制实验（MTT）评价,并检测细胞脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量、各种抗氧化酶,如谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性、细胞内活性氧含量（ROS）和胞内游离钙浓度([Ca²⁺]i)的变化以及细胞凋亡。实验发现给予H₂O₂,MDA含量明显升高,而GSH-px、SOD和CAT的活性降低,细胞内ROS含量和[Ca²⁺]i增加,并出现凋亡的形态特征。小檗碱（0.01 -10μM）预处理24小时,再用H₂O₂（150μM）处理细胞。与H₂O₂组比较,结果表明细胞存活率增加、细胞MDA含量降低、各种抗氧化酶的活性升高、细胞内的ROS含量降低、凋亡细胞数减少和[Ca²⁺]i降低。提示小檗碱对H₂O₂诱导的PC12细胞损伤有明显的保护作用。2.小檗碱对Aβ-（25-35）诱导（PC12）细胞损伤的作用及其机制本研究采用Aβ（25-35）25μM处理细胞36小时制造细胞损伤模型,应用细胞增殖抑制实验（MTT）评价,并检测细胞抗氧化酶,GSH-px、SOD、细胞内ROS含量和[Ca²⁺]i的变化以及细胞凋亡。发现给予Aβ后,胞内GSH-px、SOD的活性降低,细胞内ROS含量和[Ca²⁺]i增加,并出现凋亡的形态和特征,与凋亡有关的caspase-3蛋白表达明显升高。小檗碱（0.01 -10μM）预处理24小时,再用Aβ（25μM）处理细胞。与Aβ组比较,结果表明细胞存活率增加、抗氧化酶的活性升高、细胞内的ROS含量降低、[Ca²⁺]i降低、凋亡细胞数减少和caspase-3蛋白表达明显下降。提示小檗碱对Aβ（25-35）诱导的PC12细胞损伤有明显的保护作用。