淀粉去分支酶(Debranching Enzyme, DBE)是小麦支链淀粉合成的关键酶。本文在优化小麦中淀粉去分支酶提取以及活性分析条件的基础上,比较了不同小麦品种和不同灌浆时期淀粉去分支酶活性的变化,并对小麦中淀粉去分支酶进行了分离纯化和有关酶学性质的研究,以期为今后深入研究小麦支链淀粉合成机理提供理论依据。主要研究结果如下:1小麦中淀粉去分支酶的提取和活性分析条件的优化以纯的商品化的马铃薯支链淀粉为底物,对小麦中淀粉去分支酶提取和活性分析条件进行了研究。结果表明,巯基乙醇加入量对酶活性影响较大。随着巯基乙醇加入量的增大,酶活性呈现上升的趋势,当巯基乙醇加入量达到50mmol/L,酶活性达到最大值。再增加巯基乙醇的浓度,对酶活性仅具有稳定作用。缓冲液的类型和pH值对酶活性也有较大影响,随着pH值的增大,酶活性均呈现先增加后减少的趋势,当缓冲液为MES-NaOH,pH为6.5时酶活性达到最大值。酶促反应以30℃为宜,在此条件下反应120min内酶活性分析结果具有稳定性。据此,小麦中淀粉去分支酶提取条件为:巯基乙醇加入量为50mmol/L,以pH为6.5的MES-NaOH作为提取缓冲液;而小麦淀粉去分支酶活性分析条件为:酶促反应温度为30℃,反应时间为120min内,测定波长为540nm。2不同品种小麦淀粉去分支酶在不同时期的活性变化以四个小麦品种糥麦1号、关东107、鲁麦21、济南16为材料,其中糯麦1号为全糯性小麦,关东107为部分糯性小麦,后两种为普通小麦。研究了不同品种小麦淀粉去分支酶在不同时期的活性变化。研究表明,小麦开花至成熟的全过程中,淀粉去分支酶的活性变化呈单峰曲线。从曲线的形式来看,四种小麦的淀粉去分支酶,在灌浆的不同时期其活性变化趋势大体上一致,表现为:开花后活性快速上升,在开花后14d前后达到峰值,然后下降,但保持在较高水平,随着小麦的成熟,开花35d后活性下降迅速。