【摘 要】
:
目的:衰老会影响骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分化潜能,但其是否会影响脂肪原位干细胞的生物学功能尚不清楚。我们利用年老小鼠的皮下及内脏脂肪原位干细胞,探讨不同年龄状态下,脂肪原位干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs)成棕脂分化能力改变及其分子机制。方法:(1)选用2月龄和18月龄雄性C57BL/6J小鼠,分别提取其皮下
【基金项目】
:
上海市自然科学基金 (16ZR1430900)
论文部分内容阅读
目的:衰老会影响骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分化潜能,但其是否会影响脂肪原位干细胞的生物学功能尚不清楚。我们利用年老小鼠的皮下及内脏脂肪原位干细胞,探讨不同年龄状态下,脂肪原位干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs)成棕脂分化能力改变及其分子机制。方法:(1)选用2月龄和18月龄雄性C57BL/6J小鼠,分别提取其皮下、附睾、肩胛部脂肪干细胞进行体外培养,并诱导其向棕色脂肪分化,应用油红O染色鉴定各组细胞诱导成脂率;(2)运用实时定量PCR检测不同年龄组脂肪干细胞中miR-146b-3p表达情况;(3)通过转染miR-146b-3p模拟物使年老脂肪干细胞的miR-146b-3p过表达或转染miR-146b-3p抑制物使年轻脂肪干细胞的miR-146b-3p表达降低,再采用实时定量PCR法检测脂肪细胞相关基因PLIN1、FABP4、UCP-1、APN的表达水平。结果:(1)比较2月龄与18月龄C57BL/6J小鼠不同部位脂肪干细胞诱导成脂率,结果发现所有部位年老小鼠的脂肪干细胞成棕脂分化能力均较年轻小鼠的明显减弱;(2)与年轻组相比,年老组脂肪干细胞miR-146b-3p表达显著下降;(3)与对照组相比,过表达miR-146b-3p可改善老年小鼠脂肪干细胞的成棕脂能力;而年轻小鼠脂肪干细胞的成脂能力随miR-146b-3p表达下降而降低。结论:脂肪干细胞向棕色脂肪细胞分化能力随年龄增加而降低,miR-146b-3p可能参与其中的调节。目的:已知血管外周脂肪组织(perivascular adipose tissues,PVAT)作为一个新的管壁成分,在维持血管功能稳态中起着重要作用,然而,血管外周脂肪组织中是否存在干细胞尚未见报道,衰老进程对血管损伤重塑也未完全清楚。本研究旨在鉴定血管外周脂肪干细胞的存在及生物功能,同时,探讨衰老对其分子表型及分化潜能的影响,从而为防治衰老相关血管疾病提供理论依据。方法:(1)分别提取2月龄和18月龄野生型C57B/6J小鼠的血管外周脂肪前体细胞进行体外培养,采用Ed U染色检测自然衰老对其增殖活性的影响,采用流式分析检测两组细胞Sca1、CD90等干细胞标志物的表达水平;(2)利用特定分化培养基,分别诱导来自年轻和老年小鼠PVAT的细胞向内皮细胞、平滑肌细胞、成骨细胞、脂肪细胞分化,采用免疫荧光技术与q PCR检测相应特定分子标志物CD31、α-SMA、RUNX2、UCP-1等的表达量;(3)利用基质胶分别移植2月龄和18-20月龄绿色荧光(green fluorescence protein,GFP)转基因小鼠的管周脂肪干细胞(perivascular adipose tissue-derived stem cells,PVASCs)于野生型小鼠损伤的颈动脉外周,28天后,取其结扎的颈动脉,采用H.E.染色、天狼星红染色及免疫荧光技术检测自然衰老对管周脂肪干细胞在体内分化及血管损伤后新生内膜形成过程中的细胞分化的影响;(4)将不同年龄段的管周脂肪干细胞分别与血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)共培养,利用Edu增殖实验检测VSMCs增殖能力;(5)将PGC-1α基因干扰慢病毒转染至PVASCs,再诱导其向脂肪细胞分化,采用q PCR和Western Blot检测脂肪细胞相关基因PGC-1α、PLIN1、UCP-1、APN的表达水平,观察其转染效率及诱导情况;(6)将转染了PGC-1α干扰病毒的PVASCs移植至颈动脉结扎模型小鼠体内,通过H.E染色、免疫荧光等检测管周脂肪干细胞在体内的分化情况及血管重塑变化。结果:(1)血管外周脂肪中提取的前体细胞表达干细胞标志物,而年轻和年老的管周脂肪前体细胞增殖能力及分子表型无显著差异;(2)体内体外实验均证实与年轻组相比,衰老的管周脂肪前体细胞向内皮细胞和脂肪细胞分化能力减弱,尤其是棕色脂肪,而向平滑肌细胞和成骨细胞分化能力无改变;(3)衰老的管周脂肪干细胞促进了外膜成肌纤维的增殖,加剧了血管损伤后重塑;(4)PGC-1α参与调控衰老的管周脂肪干细胞体内、体外的分化能力,并在血管损伤重塑中发挥重要作用。结论:血管外周脂肪组织存在原位干细胞,且具有多向分化潜能;而衰老会减弱其成脂和成内皮能力,促进外膜成肌纤维增生,进而加剧血管损伤后的重塑过程。
其他文献
北朝时期,太行山东西两侧的交通联系空前紧密。北魏时期主要体现在太行山的北段,几代皇帝频繁通过“灵丘道”巡视河北诸州,以首都平城为中心,加强对太行山以东地区的控制。东魏、北齐时期主要体现在太行山的中段,高欢家族频繁通过太行山“滏口陉”往返于晋阳与邺城之间,加强军事重镇晋阳对太行山以东首都邺城地区的控制。从地理区位来讲,北魏、东魏、北齐180多年的历史,主要是以太行山为轴线展开的;具体到太行山的军事地
目的 探讨居民健康素养与新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疫情防控知信行的关系,为加强健康教育,提高全民健康素养,抵御突发重大传染病疫情威胁提供科学依据。方法 2020年9月在宝鸡市全部县区采用多阶段随机抽样方法抽取调查对象并完成问卷调查。问卷由中国健康教育中心下发,包含健康素养问卷和新冠肺炎疫情防控知信行问卷。按照国家统一评分方法,将调查对象划分为健康素养总评达标与未达标两组。采用χ2检测或秩和检验比
本文通过针对餐厨垃圾预处理方法的对比分析进而进行半连续式厌氧发酵研究以评价该类餐厨垃圾的产甲烷资源化潜能。结果表明,固液油三相分离预处理后的液相餐厨垃圾作为进料较固液混合相餐厨垃圾在厌氧发酵时具有更高的VS去除率、实际产甲烷潜能和甲烷转化率,分别为91.2%、531.5 mL CH4·g-1VS和54.3%,表明液相餐厨垃圾半连续中温湿式厌氧发酵具有良好的减量化和资源化作用效能。微生物群落分析表明
某餐厨垃圾压榨液废水处理项目设计处理规模为240 m3/d。为确保项目废水达标排放,在分析压榨液原水水质的基础上,进行了工艺预选论证与组合工艺设计。设计采用隔油沉渣+混凝沉淀+气浮为前期预处理单元,利用VABR厌氧+MBR二级A/O作为生化处理单元,最后利用臭氧催化氧化+混凝沉淀并联合活性炭滤塔作为深度处理单元。项目跟踪监测运行结果表明:工艺出水CODCr 80~120 mg/L、BOD5<5 m
目的 了解广东省产科医护人员母乳喂养指导知信行现状及其影响因素,为提高我国母乳喂养水平提供依据。方法 于2020年4月至6月采用产科医护人员母乳喂养知信行量表对广东省二级甲等以上医院256名产科医护人员进行调查。结果 本调查共回收问卷260份,有效问卷256份,有效回收率为98.4%。不同职称、产科工作年限、母乳喂养持续时间及爱婴医院知信行得分比较,差异有统计学意义(P <0.05)。产科医
目的 本研究主要探讨北京市大学生无偿献血”知信行”现状以及相关影响因素。方法 本研究基于问卷调查法,在文献基础上自行设计问卷,采用便利抽样的方法,对北京市39所高校在读的大学生进行调查,采用t检验、方差分析和χ~2检验比较不同人群无偿献血知信行的差异,建立Logistic回归模型分析其影响因素。结果 本研究共调查北京39所高校在读本科生,收集到有效问卷1 075份。研究结果显示,北京市大学生无偿献
根据武器装备自主可控背景下器件镀金引线焊点金脆的问题,介绍了金脆失效机理和金脆临界金含量的研究进展,分析了各种除金工艺方法的特点,同时针对细密、短小镀金引线除金困难的问题开展了选择性波峰焊除金工艺试验。通过工装和工艺参数的合理设计,利用选择性波峰焊设备完成了引脚间距0.5 mm、可焊端长度0.56 mm的QFP100芯片引脚的除金,除金后无连锡等缺陷且一致性好,可进行批量化除金,但编程较为复杂且对
伴随我国沼气工程的大规模发展,大量沼液面临无法消纳的问题,系统总结了现有沼液深度处理及资源化利用技术,包括生物处理技术、物理化学处理技术、组合工艺处理技术和无机组分资源化技术。此外,展望了可能的有机组分资源化技术,以期为沼液同时满足达标排放要求并实现资源化利用提供新思路。
绿色金融是商业银行适应可持续发展、履行社会责任的新标准,是将企业社会责任与自身发展相统一的必然选择。文章基于企业社会责任的角度,阐述了商业银行践行绿色发展理念的意义,并在分析其现状的基础上,思考了我国绿色金融未来的发展。虽然绿色金融在我国发展迅速,但仍然存在一定的不足,商业银行需继续完善绿色金融激励机制,推进绿色金融领域的国际合作,促进全社会树立正确的绿色价值观,并利用金融科技助力绿色金融的发展。
覆膜好氧发酵及密闭式高温好氧发酵是两种厨余垃圾处理工艺。本文通过对比分析,研究两种农村厨余垃圾处理工艺的发酵过程、产物数据和能耗投入。结果表明,两种工艺均能达到厨余垃圾无害化要求,密闭式高温好氧发酵设备运营成本高、发酵周期短,覆膜好氧发酵周期长,发酵产物更可有效促进植物生长,两项工艺均需要进一步完善。