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本论文选取岭南地区特色药用植物千斤拔(Flemingia philippinensis(MERR.et ROLFE) LI.)和牛大力(Millettia speciosa Champ.)为实验材料,对其化学成分和生物活性进行系统研究,以明确它们的化学成分以及相关的生物活性。千斤拔和牛大力的根以95%的工业酒精提取,乙酸乙酯、正丁醇萃取分部,通过正向、反向硅胶柱层析、凝胶柱层析、聚酰胺柱层析、大孔吸附树脂等方法对其中的化合物进行分离纯化。所得的化合物借助于核磁共振氢谱、碳谱、二维谱、质谱、红外光谱和紫外光谱等方法进行结构鉴定,并采用FRAP法测定了部分化合物的抗氧化活性,采用MTT法对部分化合物进行了一组对人类癌细胞株[A549(非小细胞肺癌),NCI-H460(大细胞肺癌),HepG2(肝癌),KB-3-1(表皮细胞癌),CNE(鼻咽癌),MCF-7(激素依赖性的乳腺癌)和K562(慢性粒细胞白血病)]的增殖抑制活性测定。
从千斤拔的乙酸乙酯部分离得到31个化合物,分别鉴定为5,7,3’-三羟基-2’-异戊烯基-4,5’-(3,3-二甲基-吡喃)异黄酮[5,7,3’-trihydroxy-2-(3-methylbut-2-enyl)-4,5-(3,3-dimethyl-pyrano)isoflavone,A1],auriculasin(A2),蔓性千斤拔素A(flemiphilippinin A,A3),5,7,3’,4’-四羟基-6,8-二异戊烯基异黄酮(5,7,3’,4’-tetrahydroxy-6,8-diprenylisoflavone,A4),千斤拔素D(flemichin D,A5),蔓性千斤拔素D(flemiphilippinin D,A6),蔓性千斤拔素G(flemiphilippinin G,A7),鹰嘴豆芽素(biochanin-A, A8), dorsmanin I(A9), isoderrone(A10), piscigenin(A11),芒柄花素(formononetin,A12),3’-O-methylorobol(A13),8-(1,1-dimethylallyl)genistein(A14),染料木素(genistein,A15),5,7,3’,4’-四羟基-2’,5’-二异戊烯基异黄酮[5,7,3,4-tetrahydroxy-2,5(3-methylbut-2-enyl)-isoflavone,A16],4,2’-环氧-4,5-二羟基-7,5’-二甲氧基-3-苯基香豆素(4,2’-epoxy-4’,5-dihydroxy-7,5’-dimethoxy-3-phenylcoumarin,A17),染料木苷(genistin,A18),dalparvin A(A19),7,3-二羟基-5,4,5’-三甲氧基异黄酮(7,3’-dihydroxy-5,4,5’-trimethoxyisoflavone,A20),红车轴草异黄酮苷(pratensein-7-O-β-D-glucoside,A21),樱黄素(prunetin,A22),槐属苷(sophororicoside,A23),flemicoumarin A(A24),印度黄檀苷(sissotrin,A25),flemiphilippininside(A26),山奈酚-6-C-葡萄糖苷(kaempferol6-C-glucoside,A27),dracocephaloside(A28),2,7,4’-三羟基二氢黄酮-5-O-β-D-葡萄糖苷(2,7,4’-trihydroxy flavanone-5-O-β-D-glucopyranoside,A29),对甲氧基苯丙酸[3-(4-methoxyphenyl)propanoic acid, A30]和flemingichalcone(A31)。化合物A7,A10,A19-A31均为首次从该植物中分离得到,其中化合物A7,A24,A26为3个新化合物。采用FRAP法对部分化合物测定了抗氧化活性,结果表明A11,A14和A17的抗氧化活性最强,FRAP值分别为9252.3,7962.5和6837.5μmol/g。采用MTT法对从该植物中分离得到的所有黄酮和香豆素类化合物进行了抗肿瘤活性测定,结果表明异戊烯基取代的异黄酮类、二氢黄酮类和二氢查尔酮类化合物的抗肿瘤活性最强,羟基、甲氧基取代的异黄酮的抗肿瘤活性次之,黄酮苷和香豆素类化合物对试验的7种人类癌细胞株的增殖均无明显抑制作用。新化合物蔓性千斤拔素G(A7)有很强的抗肿瘤活性,对7种人类癌细胞的体外半抑制率(IC50值)分别为7.3(A549),13.4(NCI-H460),4.8(HepG2),6.2(KB-3-1),15.3(CNE),5.1(MCF-7)和6.7(K562).μM。
从牛大力的乙酸乙酯部分离得到28个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(β-sitosterol,B1),香草酸(vanillic acid,B2),6-methoxycalopogoniumisoflavone A(B3),高丽槐素(maackiain,B4),二十四烷酸(tetracosanoic acid, B5),十七烷酸(heptadecanoic acid, B6),豆甾醇(stigmasterol,B7),7-羟基-6,4-二甲氧基异黄酮(7-hydroxy-6,4’-dimethoxyisoflavone,B8),对羟基苯甲酸(4-hydruxybenzoicacid, B9),左旋丁香脂素[(-)-syringaresinol, B10],(7’S,8’R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(B11), secoisolariciresinol(B12),(+)-(8S,8S)-Bisdihydrosiringenin(B13),异甘草素(isoliquiritigenin,B14),cyclosin(B15),β-胡萝卜甙(β-daucosterol,B16),柚皮素(naringenin,B17),甘草素(liquiritigenin,B18),3,4,7-trihydroxyflavanone(garbanzol, B19),杜鹃醇[(-)-rhododendrol,B20],2’,5,7-三羟基-4-甲氧基异黄酮(2,5,7-trihydroxy-4-methoxyisoflavone,B21),2-羟基鹰嘴豆芽素A(2-hydroxybiochanin A,B22),4,4-二羟基-2-甲氧基查尔酮(4-dihydroxy-2-methoxychalcone,B23),2,4-二羟基-4-甲氧基查尔酮(2,4’-dihydroxy-4-methoxychalcone,B24),圆齿火棘酸(pyracrenic acid,B25),cyclo-(L-Ala-L-Phe)(3-methyl-6-(phenylmethyl)-piperazine-2,5-dione(B26),demethylmedicarpin(B27)和polystachyol(B28)。化合物B3,B8,B12,B13,B15,B17-B24,B26-B28为首次从该植物中分离得到。采用FRAP法对所得的异黄酮类化合物进行了抗氧化活性测定,结果表明B15的活性最强,其FRAP值为5258.8μmol/g。对本次从该植物中分离得到的所有黄酮类、木脂素类化合物以及三萜成分圆齿火棘酸都进行了抗肿瘤活性筛选,结果表明异黄酮和木脂素类化合物的抗肿瘤活性较弱,而查尔酮(B14,B23,B24)和圆齿火棘酸(B25)的抗肿瘤活性较强。其中B25的抗肿瘤活性最强,其对6种人类癌细胞的体外半抑制率(IC50值)分别为6.7(A549)、5.2(NCI-H460)、5.4(KB-3-1)、3.5(CNE)、2.7(MCF-7)和14.0(K562)μM。