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阿魏酸(Ferulic Acid)是一种抗氧化剂,能有效的清除过氧化物、羟自由基、抗氧自由基、过氧化亚硝基。在医学上,阿魏酸作为抗氧化剂,具有抗菌消炎、抗癌、抗血栓、降血脂等生理活性;在食品工业上,阿魏酸可用于生产香素兰、作为防腐剂和食品交联剂;在化妆品行业上,阿魏酸作为抗氧化剂,广泛使用,引起了人们广大的关注。小麦麸皮作为传统工业作为动物饲料,其功能性成分如今在逐步开发出来。本研究主要是以从小麦麸皮中提取阿魏酸为目标,并采用大孔树脂吸附和洗脱、活性炭吸附和洗脱的方法,将提取的阿魏酸粗提物进一步纯化。其主要内容如下:
(1)根据阿魏酸的结构和性质,研究建立高效液相色谱法和衍生分光光度法检测阿魏酸的方法。高效液相色谱中,对色谱柱、流动相比例等影响因素进行了研究,得到高效液相的检测条件为:Hyperclone ODS C18柱(150×4.6mm,5μm)为分析柱,柱温为30℃,以甲醇与1%冰乙酸比例(V:V)为:25:75的溶液为流动相,流速为1.0mL/min。上述条件下,阿魏酸在0.0342~0.2397μg范围内,呈良好的线性关系,r=0.9999。标准偏差为0.64%,平均回收率为97.9%。衍生分光法中,检测波长为720nm,阿魏酸在0.00472~0.02832mg范围内,呈良好的线性关系,r=0.9992。标准偏差为2.339%,平均回收率为105.7%。上述两种阿魏酸定量检测方法具有简便、快速、灵敏、准确等特点。
(2)小麦麸皮中阿魏酸提取工艺研究。首先是用淀粉酶和木瓜蛋白酶去除小麦麸皮中的淀粉和蛋白。其次对阿魏酸提取工艺进行优化,以提取液中阿魏酸的含量(提取率mg/g)为指标,考察了碱液质量分数、碱醇比、固液比、亚硫酸钠量、超声温度、超声时间等主要影响因素。采用不同的因素水平设计方法:正交设计和响应面设计法,比较不同方法下阿魏酸的提取率,最终得到阿魏酸的最佳提取工艺为:碱醇比2:1、固液比1:12、亚硫酸钠添加量0.4g(2%)、碱液浓度为60%、pH为4、碱醇比2:1、超声温度为60℃,阿魏酸提取率为4.48mg/g。并且将麦麸提取阿魏酸后的残渣,经过重新处理,制备膳食纤维。
(3)利用大孔树脂和活性炭分别对阿魏酸进行分离纯化与富集,通过对阿魏酸的吸附、解吸特性和解吸动力学行为进行研究,确定了D101大孔树脂对阿魏酸有良好的吸附、解吸特性。实验中采用D101大孔树脂,对样品的上样体积、上样pH、上样流速、洗脱pH、洗脱剂浓度等因素进行了考察。最终确定了最佳工艺条件为:吸附体积12BV、洗脱流速1ml/min、洗脱体积5BV、吸附pH6.2,洗脱浓度58.22%,洗脱pH7.1。将洗脱液通过高效液相检测,得到阿魏酸的纯度为75.65%。