背景:急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）的各类治疗方法并不十分理想。嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）T细胞疗法在B系淋巴细胞白血病中成效卓越,但在AML中疗效不佳。在前临床实验中效果优异的如CD123 CAR T细胞疗法及CD33 CAR T细胞疗法在一期临床试验中几近无效,开发适合AML的新靶点迫在眉睫。CD56在AML中的表达率约为20%,相关抗体偶联药物在肺癌、卵巢癌、神经母细胞瘤等的前临床实验中已初步被证实安全有效,有望作为AML的潜在治疗靶标。在缺氧微环境下,缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1a）的表达升高,参与AML的进展及耐药,并且减弱T细胞效能,抑制HIF-1a或许可作为提升T细胞杀伤效果的关键点。目的:构建CD56 CAR T细胞,探讨在缺氧条件下用PX-478抑制HIF-1a对CD56CAR T细胞的影响及其背后机制。方法:慢病毒将CD56 CAR转入T细胞中,利用流式细胞术判断转染率及杀瘤效果。依据细胞死亡比例筛选出PX-478的浓度范围,并用western blot法验证其对HIF-1a的抑制作用。将CD56 CAR T细胞与靶细胞在不同浓度PX-478中低氧共培养,初步判断PX-478对CD56 CAR T细胞效果的影响,而后用PX-478在低氧环境中分别预处理CD56 CAR T细胞24小时或4天后,验证杀伤效果,并测量CAR T细胞亚群的改变。利用慢病毒将荧光素酶转入KG1a细胞中,经嘌呤霉素筛选后按5×10~6/只注射至小鼠体内,经外周血流式细胞术、骨髓及脾涂片、病理切片、活体成像、生存期观察等多个维度判断小鼠是否成模,为体内实验做准备。结果:通过慢病毒转染成功构建了CD56 CAR T细胞,其杀伤效果与CD123 CAR T细胞相近。PX-478的较为合适的浓度在0-20μM之间,且能够抑制HIF-1a蛋白合成。在缺氧环境中,CD56 CAR T细胞的杀伤效果受损,抑制HIF-1a能中和这种负向反应,在时间长时更为明显。在低氧环境下抑制HIF-1a,CD56 CAR T细胞的Th1、Th17及CD8+中央记忆T细胞的亚群有所上升,Treg细胞及CD4+记忆T细胞的亚群无明显改变。输注荧光素酶标记的KG1a细胞的小鼠体内及成像可测得肿瘤细胞,且生存期明显缩短。结论:CD56 CAR T细胞有望作为AML的新疗法,在缺氧环境中抑制HIF-1a能够提升CAR T细胞效能,利用荧光素酶标记的KG1a细胞可成功建立动物模型。