苏芸金芽孢杆菌的电穿孔转化及其多功能工程菌的构建

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该论文对苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus,Bc)部分菌株的电穿孔转化进行了研究,主要从电穿孔的供体质粒和受体菌株等方面讨论了各种因素对该方法的影响.同时利用电穿孔方法对部分Bt的高效野生株进行遗传改良,以期获得含有cry1Ac和cry1C高效基因组合的对鳞翅目棉铃虫、甜菜夜蛾都有效的广谱工程株.结果证明Bti t-1897是一种进行遗传改良工程菌构建的良好受体.以Bti t-1897的pSB1402转化子T5为受体,再次用电穿孔方法导入质粒pAMY,得到具有cry1C、cry1Ac双基因组合的转化子t-1897 TT13.对TT13的生物测定初筛显示TT13保持了T5对淡色库蚊和甜菜夜蛾的毒力,同时也增加了对棉铃虫的毒杀作用.对于T5和TT13的杀虫晶体蛋白进行SDS-PAGE分析表明转入的cry1C和cry1Ac基因都得到了高表达.
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