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目的: 研究脓毒症幼鼠肠道菌群紊乱、易位和血清炎症因子 TNF-α的变化,以及鱼油干预后对上述情况的影响。 方法: 1、实验分组及喂养方式:选取24只健康SD幼鼠(4周龄),根据完全随机分组原则分为三组:正常对照组,模型组及鱼油治疗组(每组各8只)。正常组为正常状态每日饲喂基础日粮,模型组饲喂每日基础日粮,鱼油治疗组则是基础日粮加鱼油灌胃。按上述方式分别喂养1周。第8天时模型组、鱼油治疗组幼鼠皆制作脓毒症模型,并依照5mg/kg的剂量经腹腔注射制剂——大肠杆菌脂多糖(LPS)的方法造模,三组继续如上述喂养方式喂养3d。 2、标本采集:制模第三天下午2时开胸收集实验所需各组织,心脏取血用于ELISA实验测定血清TNF-α,采集并准确称量肝、脾、肾、肠系膜淋巴结、结肠内容物各1g,在距离屈氏韧带8厘米处迅速切除约10厘米回肠段置于福尔马林中浸泡以用于病理学检查。 3、观察指标:观察各组幼鼠肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌)及细菌易位率的变化及比较;ELISA实验测定各组幼鼠血清炎症因子TNF-α数值变化;采用苏木精—伊红染色法(HE染色),显微镜下取每组(各组随机2只)幼鼠回肠组织观察病理学改变。 结果: 1、一般表现:模型组制模后出现病态表现:精神差,活动、食纳减少,寒战竖毛,呼吸增快,口唇发绀。剖腹时可见少数幼鼠存在腹腔积液,部分肠管肿胀、发黑。鱼油治疗组与模型组对比,各病态表现均有所减轻,正常对照组无上述病态表现。 2、脓毒症幼鼠存在肠道菌群紊乱状态,在细菌具体数量上表现为肠道双歧杆菌及肠道乳酸杆菌明显下降(P<0.01),肠道大肠杆菌及葡萄球菌则明显升高(P<0.01),鱼油对脓毒症幼鼠菌群紊乱具有一定纠正作用(P<0.01)。它增加了上述肠道双歧、乳酸杆菌的数目(P<0.01),降低了大肠杆菌、葡萄球菌的数目(P<0.01),减少了肠道细菌易位的发生。 3、脓毒症幼鼠血清炎症因子 TNF-α明显升高(P<0.01),鱼油能显著减低TNF-α数值(P<0.01)。 4、脓毒症幼鼠存在肠道粘膜组织学损伤,鱼油可改善脓毒症幼鼠回肠黏膜损伤和回肠组织病理变化。 结论: 脓毒症幼鼠肠道菌群存在紊乱及易位,伴肠道粘膜损伤,血清炎症因子TNF-α明显升高;鱼油干预可促进肠道双歧、乳酸杆菌的生长使数量增加,抑制大肠杆菌及葡萄球菌而使数量降低;可减少细菌易位的发生;对血清 TNF-α的释放具有一定抑制作用,可减轻组织和器官的一系列损伤;改善了脓毒症幼鼠回肠黏膜损伤和回肠组织病理变化,使肠道免疫屏障保持完整,提高肠道黏膜修复力。