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目的:探讨靶向G3BP（RasGAP结合蛋白）新药多肽P162是否通过抑制Hedgehog信号转录因子Gli-1对人食管癌细胞株Eca109起放射增敏作用方法:1.多次反复以8Gy剂量X线(总共累计60Gy)照射食管癌Eca109细胞诱导Eca109R细胞；2.采用CCK8法测Eca109及Eca109R细胞在0、2、4、6、8Gy下增殖抑制率，比较两者之间的差异；3.免疫细胞化学法、免疫荧光技术测Gli-1在Eca109及Eca109R细胞内表达；4. HE染色观察20μmol/L P162作用48小时后Eca109及Eca109R细胞形态学改变；5. Western blot测照射后Eca109细胞在1、2、4、24、48、72h、7、10、14、18d时间点核内Gli-1表达，以未照射Eca109细胞为对照；Western blot测照射后Eca109R细胞在48h时间点核内Gli-1表达，以未照射Eca109R细胞为对照；6. Western blot测处理组细胞核内Gli-1表达：处理组给予两种干预方法,先20μmol/L P162干预48h，后6Gy照射，分为四组，即：未照射不加药组、未照射加药组、照射加药组和照射不加药组，每组均含Eca109、Eca109R两种细胞。7.流式细胞仪测处理组细胞凋亡率。结果:1.在相同的照射剂量及相同时间下，Eca109R细胞增殖抑制率明显低于Eca109细胞；2.免疫细胞化学、免疫荧光技术结果显示Eca109、Eca109R细胞中胞核、胞浆均表达蛋白Gli-1，两者免疫组织化学染色强度分别为:1.05629±0.098,1.703975±0.055(P＜0.05)，免疫荧光阳性细胞率分别为:39.9567±0.0097%,66.4589±0.0251%(P＜0.05),差异有统计学意义，提示Eca109较Eca109R细胞低表达核内蛋白Gli-1；3. HE染色结果：未处理的Eca109细胞呈圆形或不规则多边形,如铺路石排列，Eca109R细胞呈不规则梭型，不规则排列。经20μmol/L P162处理48h后的Eca109细胞皱缩聚集，变为不规则条形，可见细胞裂解相互融合，Eca109R细胞亦表现为皱缩聚集，可见核缩小、多核，细胞裂解融合。4. Western blot测放疗后Eca109细胞在1、2、4、24、48、72h、7、10、14d、18d时间点核内Gli-1表达，结果显示:照射后核蛋白Gli-1逐渐下调，与control（未照射Eca109细胞）相比，第48h表达最低(P＜0.05)，此后逐渐上调，第14d表达最高(P＜0.05)，18d趋于下降趋势；与照射前相比，Eca109R细胞照射后48h核内蛋白Gli-1下调。5. Western blot测照射及P162处理后Eca109、Eca109R细胞核内Gli-1表达变化：未照射加药组较未照射不加药组低表达Gli-1,其中未照射不加药组中,Eca109R较Eca109高表达Gli-1(F=135.73, P<0.0001);照射加药组较照射不加药组(照射后2、14d)低表达Gli-1,差异均有统计学意义(P＜0.05),其中照射不加药组(照射后2、14d)中, Eca109与Eca109R的Gli-1表达无统计学差异[分别为F=1.89,P=0.2064(2d), F=0.45,P=0.5191(14d)].结论: Hh信号转录因子Gli-1与食管癌放射抗拒相关。P162放射增敏作用可能与抑制转录因子Gli-1、促细胞凋亡相关。