妊娠高血压患者血管内皮损伤与血小板活化指标的检测结果及意义研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linxinrudo
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目的:探索血管内皮损伤与血小板活化相关指标在妊娠高血压疾病中的意义。通过检测血管内皮细胞损伤标志物血管性血友病因子(VWF)、血管性血友病因子前肽(VWF-PP)评估妊娠高血压疾病是否存在血管内皮损伤。通过检测血小板表面活化标志物P选择素(CD62P)、溶酶体膜蛋白(CD63)、CD40配体(CD40L)、髓样细胞触发受体-1(TLT-1)及血浆中可溶性活化标志物CD62P、sTLT-1、sCD40L,评估血小板活化及其程度。探究血管内皮损伤及血小板活化指标检测在妊娠高血压疾病中的应用价值,探寻动态监测疾病进展的有意义的指标。方法:选取2020年05月至2021年01月,在苏州大学附属第一医院建卡产检并分娩的妊娠期高血压疾病患者61例,其中妊娠期高血压组18例,子痫前期组(PE组)30例,慢高合并PE组13例。同时期建卡产检并分娩的正常妊娠产妇57例和未孕健康女性25例。所有观察对象在未接受治疗前,于清晨空腹状态下,前臂肘静脉采集EDTA抗凝血样2 ml。采集的血样标本30 min内使用全自动血细胞分析仪检测标本的白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)。另采集3.2%柠檬酸钠抗凝血样2.7 ml,取50 μL全血与450 μL PBS溶液进行1:9稀释后待用。剩下血样在室温下2000 rpm离心10 min后收集血浆,分装后于-20 ℃保存待用。利用ELISA方法检测标本中VWF、VWF-PP含量。使用流式细胞仪检测标本血小板表面CD62P、CD63、CD40L及TLT-1阳性表达率。利用ELISA方法检测标本血浆中 CD62P、CD40L、TLT-1 浓度。结果:(1)本实验研究纳入病例组61例,其中妊娠期高血压组18例,子痫前期组(PE组)30例,慢高合并PE组13例。正常妊娠对照组57例,未孕妇女对照组25例。一般资料分析结果表明,妊娠高血压疾病组(HDP组)在入院体质数(BMI)、入院收缩压、入院舒张压与正常妊娠组和未孕对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。年龄和孕次方面与正常妊娠组比较无统计学差异,但与未孕对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HDP组与正常妊娠组分娩结局比较发现HDP组的分娩孕周早于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.001)。新生儿结局中,HDP的新生儿体重低于正常妊娠组(2337.98±979.52VS 3279.02±604.52,P<0.001),且新生儿转NICU率明显高于正常妊娠对照组(36.07%VS 3.51%,P<0.001)。血常规结果统计分析表明,HDP组的白细胞计数均值高于正常妊娠组,且差异有统计学意义(P=0.027)。HDP组血小板计数低于正常妊娠组,但差异无统计学意义(P=0.324)。平均血小板体积计数(MPV)比较后发现,HDP组MPV高于正常妊娠组,但差异无统计学意义(P=0.22)。观察对象测量血浆中VWF及VWF-PP含量后发现,HDP组血浆中VWF浓度百分数为187.98±28.83高于未孕对照组(82.43±30.15,P<0.01)及正常妊娠组(157.10±45.04,P<0.01)。VWF-PP浓度百分数相比较,正常妊娠组为201.56±156.19,高于未孕对照组及HDP组。正常妊娠组与未孕对照组比较差异有统计学意义,与HDP组比较差异无统计学意义。将HDP组观察对象的VWF含量与VWF-PP含量做相关性分析,VWF-PP为自变量,VWF为因变量。计算后得出线性方程为 Y=0.338X+101.2,相关系数 r=0.528,P<0.05。观察对象的血标本经过激活剂处理后分别用流式细胞仪测量其各项标志物的表达阳性率。结果发现观察对象的血小板标志物激活后表达的阳性率均高于激活前。组间比较发现,HDP组与正常妊娠组血小板表面CD62P、CD63、TLT-1均高于未孕对照组,且差异有统计学意义(P<0.01)。CD40L在静息时三组组间比较没有统计学差异。HDP组TLT-1表达阳性率高于正常妊娠组,且差异有统计学意义(P<0.01)。妊娠期高血压组中子痫前期组CD62P、CD63及TLT-1与未孕对照组相比均明显高于未孕对照组,且差异有统计学意义(P<0.01)。子痫前期组血小板表面TLT-1表达阳性率明显高于正常妊娠组(16.42±17.35 VS 9.62±8.45,P<0.01)。酶联免疫吸附法检测血浆中CD62P、CD40L、TLT-1浓度,结果发现,HDP组血浆中CD62P浓度均高于未孕对照组和正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.01)。表明妊娠高血压疾病患者血小板活化程度较高并且可能处于内皮损伤后血小板活化状态。正常妊娠组与未孕对照组比较,血浆CD62P浓度均值高于未孕对照组。HDP组中血浆中TLT-1浓度高于正常妊娠组,且差异有统计学意义(P<0.01)。血浆CD40L浓度比较发现HDP组浓度高于未孕组及正常妊娠组,但组间均无统计学差异。妊娠高血压疾病组组间比较结果后发现随着疾病进展,子痫前期及重度子痫前期组及慢性高血压组对比妊娠高血压组,血浆中可溶性CD62P较高,CD40L及TLT-1有下降趋势,较低于妊娠高血压组。进一步统计学分析后发现组间无统计学意义。结论:(1)妊娠高血压疾病组(HDP组)较正常妊娠组及未孕对照组存在血管内皮功能受损及血小板活化状态。(2)HDP组VWF抗原浓度显著高于未孕组及正常妊娠组,但VWF-PP浓度无明显升高,且组间无统计学差异。表明妊娠高血压疾病患者体内较正常妊娠患者存在更为广泛血管内皮功能受损,但可能处于慢性持续性损伤状态。(3)妊娠状态下血小板表面标志物CD62P、CD63、TLT-1表达阳性率高于正常妊娠组,证明妊娠状态下血小板处于较高水平活化状态。但差异无统计学意义。(4)血小板表面标志物TLT-1在HDP组中表达阳性率高于正常妊娠组及未孕对照组且PE组TLT-1高于正常妊娠组。(5)血浆中sCD62P、sTLT-1在HDP组中浓度高于正常妊娠组。PE组及慢高合并PE组血浆中CD62P高于妊娠期高血压组。
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