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章鱼胺(Octopamine)是一种重要的生物胺和神经介质,起广泛的生理作用,有调节代谢与能量平衡的功效,是目前唯一商品化的防治肥胖症与糖尿病的β3-肾上腺素能受体激动剂。作为一种天然的β3-肾上腺素能受体激动剂,章鱼胺可以单独或与其它原料联合用于减肥与糖尿病的治疗,可以作为食品、健康食品原料乃至临床药物的辅助制剂。天然章鱼胺是D型的,它的生物活性是L型章鱼胺的三倍,有资料指出枳实和鱼露是天然章鱼胺的主要来源,但枳实和鱼露中所含章鱼胺的含量都不高,因此寻找新的天然章鱼胺的来源,并将之提取出来,就是本课题的目的。本论文首先分析研究了市售水产品可食部分的章鱼胺含量,其次是寻找从鱿鱼内脏水解液中提取章鱼胺的有效方法,为进一步有效的开发利用天然章鱼胺打下了基础,最后是通过化学拆分的方法对消旋的章鱼胺工业品进行D型与L型的拆分,从而为得到D型章鱼胺的纯品并测得其纯度提供实验依据。
1.水产品可食部章鱼胺含量的研究
测定各种淡水和海水水产品可食部中β3-肾上腺素能受体激动剂章鱼胺的含量,为水产品中章鱼胺的开发利用提供根据。取鱼、甲壳类、头足类可食部位匀浆后超声处理,用HPLC测定离心后上清液的章鱼胺含量。结果表明8种淡水鱼肉章鱼胺含量在30~130μg·g-1之间,其中,背肉普遍比腹肉中含量高。海水鱼以及淡水甲壳类的章鱼胺含量与淡水鱼大致相似。海水甲壳类中章鱼胺含量特别高,是淡水和海水鱼,淡水甲壳类的几十倍,甚至千百倍。头足类的章鱼胺含量也比较高,在海洋藻类中未检测出章鱼胺。海洋贝类等是水产品中章鱼胺最丰富的来源,是减肥者与糖尿病人的理想食物。
2.鱿鱼水解液中章鱼胺的分离和提取
鱿鱼水解液中章鱼胺的含量与其他水产品相比高了很多,从水解液中有效提取较纯的章鱼胺,为天然章鱼胺的进一步开发利用打下基础,并使鱿鱼的废弃物继续得以利用,减少不必要的浪费。论文中采用静态吸附和动态吸附相结合的方法,综合考虑吸附量、解吸率等因素,研究硅胶分离提取鱼露中章鱼胺的吸附性能和洗脱参数。结果表明:60~100目硅胶对水解液中章鱼胺有较好的吸附分离效果,该硅胶对水解液中章鱼胺的静态饱和吸附量达3.209mg·g-1(干树脂),30%的乙醇为最佳洗脱剂,洗脱率达95%。60~100目硅胶处理后,能有效分离章鱼胺,再将其过AMBERJET1200Na(2cm×24cm)柱,浓缩收集到的氨水洗脱液,采用岛津SCL-10A vp HPLC分离系统,样品在流动相0.02M柠檬酸-0.02M磷酸二氢钠(7∶3),PH=3、流速10 ml/min、检测波长274 nm的条件下被色谱柱Sepax HP-C18柱(21.2mm×250mm,10μm)精制,冷冻干燥后得到较纯的章鱼胺白色粉末。
3.章鱼胺工业品的手性拆分
天然章鱼胺是D型的,它的生物活性是L型章鱼胺的三倍,为了使章鱼胺更有效的发挥功效,本论文采用了化学拆分,把等量左旋和右旋体所组成的外消旋的章鱼胺工业品与另一种纯的光学异构体D-樟脑磺酸作用生成D-樟脑磺酸盐,即形成了两个非对映体,然后利用其物理性质的溶解性不同,用过滤将其分开,再用结晶-重结晶手段将其提纯,然后去掉D-樟脑磺酸,就得到了较纯的D-章鱼胺结晶。为得到D型章鱼胺的纯品并测得其纯度提供了实验依据。
由于国内目前尚未对β3-肾上腺素能受体激动剂一章鱼胺有相应完善的研究报告或产品,本课题的研究很有可能可以很好的推动对章鱼胺的进一步研究,为更好地生产和应用章鱼胺提供坚实的基础。通过对市售水产品可食部章鱼胺含量的比较过程中发现了鱿鱼的章鱼胺含量很高,其废弃物也有很高的章鱼胺含量,达到超过5000μg·g-1,考虑到我国当前鱿鱼加工业中存在资源利用率低和环境污染严重两个问题,本研究以鱿鱼内脏的水解液为原料研究有效成分的分离,研究从鱿鱼内脏水解液中提取章鱼胺的有效方法,为天然章鱼胺的制取提供实验依据。同时,试图用化学拆分的方法对消旋章鱼胺工业品进行拆分从而得到较纯的D型章鱼胺,为得到D型章鱼胺的纯品并测得其纯度提供实验依据。