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研究背景：糖尿病肾病是糖尿病(DiabetesMellitus, DM)最常见、最严重的微血管并发症,是引起糖尿病患者死亡最主要的原因,在过去的10年中,糖尿病肾病的发生率增加了2倍,目前糖尿病肾病占终末期肾脏病(end stage renal diseases, ESRD)50%以上。虽然糖尿病肾病的发病机制至今未明,越来越多的研究表明高糖诱导的ROS的过量产生是DN的中心环节。传统的观念认为DN的病理损害主要在肾小球,最新的研究发现,肾小管间质病变也是DN的早期和原始特征,并不继发于肾小球的病变,并且是预测肾功能恶化的重要指标。衔接蛋白p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白,存在于线粒体膜间隙,在糖尿病状态下,p66shc的表达上调,活化的p66shc明显增加,氧化细胞色素C(CytC),导致线粒体ROS过量产生,加重细胞的氧化损伤和凋亡。研究表明,第36位丝氨酸(Ser36)磷酸化在p66Shc活化的过程中是必需的。尽管目前大量体内外实验已发现：STZ诱导的糖尿病鼠肾脏p66Shc表达上调,敲除p66Shc基因可以减少STZ诱导的1型糖尿病肾病大鼠肾组织产生的氧化应激,抑制NF-κβ的活性,降低AGE的形成,保护肾脏组织结构和功能,改善肾组织病理变化,降低蛋白尿。基于以上研究,我们认为p66shc在糖尿病肾病患者肾组织表达上调,可能与DN患者小管上皮细胞氧化损伤及细胞凋亡密切相关。为此,我们展开如下实验。目的：观察糖尿病肾病患者外周血p66shc的表达,分析其与临床表型的关系方法：随机选取经临床确诊为糖尿病肾病的患者30人及非糖尿病肾病患者(原发性肾病)15人,正常对照组15人。采用real-time PCR检测其外周血p66shc的表达。结果：real-time PCR结果显示：与正常对照组相比,非DN轻微病变组患者外周血p66shc表达水平升高(P<0.05)；糖尿病肾病组与非DN轻微病变组及对照组相比,p66shc表达明显升高(P<0.05),统计学有显著差异。相关分析发现p66shc的表达与糖尿病持续时间、甘油三酯及血糖水平密切相关。结论：糖尿病肾病患者外周血p66shc的表达上调目的：观察衔接蛋白p66shc在糖尿病肾病患者肾组织中的表达,初步探讨P66shc的表达与糖尿病肾病氧化应激损伤的关系方法：随机选取经临床和肾脏病理确诊为糖尿病肾病12人及轻微病变患者(原发性肾病)10人。采用]PASM、Masson、PAS染色观察肾脏普通病理改变;分别用免疫组化、免疫荧光检测p66shc、p-p66shc及ROS表达变化结果：肾脏普通病理结果显示：DN组患者肾小球系膜基质中-重度增生,伴多个节段结节状硬化,出现典型Kimmelstiel-Wilson结节,基底膜弥漫性增厚僵硬,肾间质多灶性小管萎缩、间质纤维化,伴大量炎症细胞浸润,部分小管代偿性扩张；对照组患者仅见系膜细胞及系膜基质节段性轻度增生,部分肾小管上皮细胞空泡变性,肾间质部分小灶性纤维化,伴少量淋巴单核细胞浸润,血管未见明显异常,提示糖尿病肾病患者肾小管间质损伤程度明显高于对照组。免疫组化、免疫荧光显示：p66shc主要表达对照组患者肾小管上皮细胞,肾小球系膜细胞仅少量表达；与非DN轻微病变组相比,DN组患者肾小管上皮细胞p66shc表达明显上调,肾小球系膜细胞表达轻度上调,同时肾间质淋巴单核细胞p66shc的表达明显升高(p<0.05)。结论：糖尿病肾病患者肾组织ROS水平明显升高,同时肾小管细胞中p66shc表达明显上调,提示p66shc可能与糖尿病肾病氧化应激损伤。