鬼针草提取物抑菌及抗氧化活性研究

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本课题主要研究鬼针草提取物的抑菌活性,光、热和酸碱度对提取物抑菌活性的影响,抑菌活性物质提取的最佳工艺条件,鬼针草抑菌活性部位、活性部位主要有效成分及其含量。还初步探讨了鬼针草提取物抗氧化活性及其所在萃取部位。主要研究内容和试验如下:用滤纸片法、生长速率法,测鬼针草水提物、醇提物对7种供试菌的抑菌效果。结果显示:鬼针草醇提物具有较宽的抑菌谱,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念球菌、荔枝疫霉、水稻纹枯有不同程度抑菌效果,对大肠杆菌、稻瘟菌无抑菌效果。比较鬼针草醇提物浓度对抑菌效果的影响,结果表明:50mg/ml-800mg/ml范围内,提取物浓度越高,对供试菌的抑菌效果越显著。鬼针草醇提物对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(MIC)为12.5mg/ml,对枯草芽孢杆菌最低抑菌浓度(MIC)为6.25mg/ml。在单因素试验基础上,设计正交试验,优化鬼针草提取的工艺条件,得出提取鬼针草抑菌活性物质的最佳工艺条件为:95%乙醇70℃提取时间2h,提取次数3次。对鬼针草醇提物进行光、热和酸碱稳定性测试,结果表明鬼针草醇提物对紫外光、热稳定性良好,pH4~8范围内抑菌效果稳定。鬼针草醇提浸膏系统溶剂萃取物的抑菌结果表明,鬼针草的乙酸乙酯相抑菌效果最好。经化学显色实验,初步判定黄酮类化合物是鬼针草乙酸乙酯相主要活性物质。以芦丁为标准品,建立芦丁标准工作曲线的回归方程,测定鬼针草醇提物、乙酸乙酯相干膏总黄酮含量分别为8.31%、9.93%。鬼针草醇提物经D-101大孔树脂乙醇梯度洗脱后,60%乙醇洗脱物总黄酮含量最高,达到92.17%。该洗脱物对金黄色葡萄球菌MIC值为6.25mg/ml,对枯草芽孢杆菌MIC值为3.125mg/ml,较之前测得的鬼针草醇提物对这两种供试菌MIC值分别为12.5mg/ml、6.25mg/ml,经大孔树脂分离纯化后抑菌作用大大增强。推断鬼针草黄酮类化合物是抑菌主要物质。分别对鬼针草醇提浸膏系统溶剂萃取物进行抗氧化活性试验,结果表明石油醚萃取物清除超氧阴离子作用最强,为VC的68.9%。在总还原力、清除·OH、清除DPPH·能力方面,鬼针草醇提正丁醇萃取物的抗氧化能力最强。浓度同为1mg/ml时,鬼针草醇提正丁醇萃取物还原力为VC的72.9%,清除DPPH·能力为VC的92.8%,清除·OH能力是VC的1.03倍。鬼针草醇提乙酸乙酯萃取物清除·DPPH和·OH能力较强,分别是同浓度VC的62.35%和70.6%。综上,鬼针草具有较强的抑菌活性和抗氧化能力,可为鬼针草作为新型天然防腐剂、抗氧化剂的开发应用提供实验参考依据,促进鬼针草资源更有效的利用。
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