目的探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand，TRAIL)基因对恶性黑色素瘤细胞的凋亡作用。方法采用PCR方法，以TRAIL质粒为模板，扩增出编码sTRAIL的TRAIL胞外区片段，将此TRAIL胞外区片段插入真核表达载体，构建出穿梭质粒pSNAV2.0-sTRAIL，利用细胞内质粒DNA同源重组法将扩增出的sTRAIL片段插入至腺相关病毒载体上，构建出携带有表达sTRAIL的重组腺相关病毒rAAV2-sTRAIL。将该病毒体外转染人恶性黑色素瘤细胞A375（实验组）及人胚肾细胞HEK293（对照组），ELISA、Western blot法检测目的基因在细胞中的表达，MTT法检测其对细胞增殖的影响，电镜下观察及流式细胞仪检测rAAV2-sTRAIL对A375的凋亡作用，分析其体外抗人恶性黑色素瘤细胞的机制。结果成功构建出病毒rAAV2-sTRAIL，PCR检测目的基因条带正确；Western blot方法可在细胞内检测出现明显TRAIL条带；转染48小时后ELISA法检测细胞培养液中TRAIL，HEK293培养基中浓度为190.6±24.1ng/ml，A375培养基中浓度为56.7±12.4ng/ml；MTT法见rAAV2-sTRAIL可对A375增殖有明显影响，而对HEK293无明显影响；电镜观察及流式细胞仪检测证实rAAV2-sTRAIL可诱导恶性黑色素瘤细胞A375凋亡。结论AAV2-sTRAIL可以在人正常细胞HEK293及恶性黑色素瘤细胞A375中高效表达并分泌到胞外，对恶性黑色素瘤细胞A375有明显的诱导凋亡作用，而对HEK293无明显影响。