产过敏素的固氮工程菌的构建及特性研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaodaoluan
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该文通过三亲交配的方法将带有hrpN基因簇的重组质粒pCPP430导入耐氨固氮工程菌Enterobacter cloacae E26(pMC73A)中,在Sp,Kan,Amp平板上筛选到接合子20个,编号为E1,E2,E3……E20;接合子在番茄叶片上的过敏反应表明,除E6,E20以外,其他的接合子都同现与阳性对照DH5(pCPP430)一样典型的过敏反应症状.用表达harpin基因的固氮工程菌E4进行了诱导植物抗病性和促进植物生长的研究,发现表达harpin基因的重组菌险可明显诱发烟草、番茄叶片的过敏反应外,用该菌的菌悬浮液喷雾诱导后,番茄对番茄病毒病、番茄青枯病青枯病,辣椒对辣椒青枯病、烟草对烟草青枯病的抗性比E26(pMC73A)一清水对照均有不同程度的提高,与阳性对照DH5(pCPP430)的诱导的抗性效果相当,E4诱导抗性效应按强弱排列是:烟草抗青枯病100﹪,辣椒抗青枯病76.32﹪,番茄抗青枯病66.6﹪,番茄抗花叶病毒病34.9﹪.E4对番茄、烟草、辣椒菌期植株的生长有促进作用,表现在使株高增长34﹪、21﹪和7﹪.进一步研究了E4在水稻根际和番茄、烟草叶面的生存能力,结果表明:E4在根围和叶围的存活时间都不太长,尤其是在叶围,仅仅6天就不能回收到菌.E4在根际存活的时间比在叶围要长一些.用八种单一碳源培养与ERIC-PCR相结合的方法,研究了E4对根际微生物区系的影响,结果显示E4施用到环境中后,与其遗传特性相近的肠杆菌类在根际占据了主导地位,对根际微生物区系的种群数量和种群结构有影响.
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