目的：通过研究体外培养骨骼肌卫星细胞的方法，为研究骨骼肌卫星细胞与运动性骨骼肌损伤提供试验材料，探讨谷氨酰胺对骨骼肌卫星细胞的作用。 方法：用Ⅳ型胶原酶和胰蛋白酶两步酶消化法分离、获取大鼠腓肠肌卫星细胞。细胞纯化后，在不同条件培养液中培养。每天在倒置相差显微镜下观察细胞的生长、分化情况。用骨骼肌肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定骨骼肌卫星细胞。用MTT法绘制传代细胞的生长曲线。将谷氨酰胺加入培养液中，用MTT法测定细胞光吸收值，观察谷氨酰胺对卫星细胞生长的作用。 结果：酶消化法获取的骨骼肌卫星细胞经差速贴壁法纯化后，细胞纯度在95％以上。细胞在生长培养基中，以分裂、增殖为主；在分化培养基中，细胞融合，形成肌管。骨骼肌肌动蛋白免疫细胞化学染色后，肌卫星细胞胞浆呈弱阳性，肌管呈强阳性。传代细胞增殖速度快，第3-5天为对数生长期。与空白对照组比较，培养液中加入不同浓度谷氨酰胺后，卫星细胞的光吸收值升高，但在最大浓度组表现为光吸收值降低；随观察时间延长，细胞经相同浓度谷氨酰胺作用后，光吸收值呈逐渐升高。 结论：1、使用两步酶消化法分离、差速贴壁法纯化的原代骨骼肌卫星细胞成活率较高，亦可避免成纤维细胞的污染，从而得到高纯度的卫星细胞。2、将原代骨骼肌卫星细胞接种于经鼠尾胶原预先处理的培养瓶内，可提高原代骨骼肌卫星细胞的成活率。3、提高培养基中血清浓度，细胞表现为增殖而抑制分化，血清浓度越高，卫星细胞的增殖能力也越强；降低血清浓度则可促进卫星细胞分化而形成肌管。细胞密度对卫星细胞的培养也有很重要的影响，体外培养的细胞当其密度达到80％以上而不进行传代，细胞增殖抑制，出现分化，相互融合，形成多核肌管。4、α—sarcometricaction单克隆抗体可以特异性的标记卫星细胞，而作为阴性对照的成纤维细胞不染色，可以作为卫星细胞鉴定的方法。5、谷氨酰胺对体外培养的骨骼肌卫星细胞生长有一定促增殖效应，并与其浓度及作用时间相关。