【摘 要】
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目的:观察术前连续电针预刺激“大椎穴”、“百会穴”对老年患者术后认知功能的影响;并通过建立动物模型,从细胞自噬角度对电针预刺激影响术后认知功能的机制及调控通路进行探索,为防治术后认知功能障碍提供新的思路和方法,为电针在围术期的应用提供理论支持。方法:（1）临床研究:选择择期行胃肠道开腹手术患者60例,年龄65～89岁,ASAⅡ级或Ⅲ级,随机分为两组,电针预刺激组（E组）和假电针组（C组）,每组30
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目的:观察术前连续电针预刺激“大椎穴”、“百会穴”对老年患者术后认知功能的影响;并通过建立动物模型,从细胞自噬角度对电针预刺激影响术后认知功能的机制及调控通路进行探索,为防治术后认知功能障碍提供新的思路和方法,为电针在围术期的应用提供理论支持。方法:（1）临床研究:选择择期行胃肠道开腹手术患者60例,年龄65～89岁,ASAⅡ级或Ⅲ级,随机分为两组,电针预刺激组（E组）和假电针组（C组）,每组30例。E组患者于手术前3天开始至手术前1天,每天同一时间进行电针刺激30 min,连续3天;C组患者在同一时间行非经非穴假电针刺激。两组患者均在全身麻醉下进行手术治疗,术后给予经静脉患者自控镇痛。分别在术前1天、术后1天、术后3天、术后7天,采用简易精神状态量表（MMSE）、蒙特利尔评估量表（MoCA）北京版对患者的认知状态进行评估,计算两组患者发生术后认知功能障碍的发生率,采用ELISA法检测患者血清S-100β蛋白浓度。（2）实验研究:取20～22个月龄SD大鼠随机分为4组:空白对照组（C组）;手术模型组（M组）;电针组（E组）;自噬抑制剂组（CQ组）。C组不做处理;M组予剖腹探查术;E组予剖腹探查术+电针预刺激;CQ组予剖腹探查术+电针预刺激+腹腔注射自噬抑制剂氯喹。分别于术前1天、术后1天观察水迷宫实验中大鼠穿越平台数及游泳总距离;应用Western blot检测海马组织自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1,P62以及AMPK通路相关蛋白AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）的表达水平,计算p-AMPK/AMPK;并取大鼠海马组织在电子显微镜下观察,比较自噬体以及自噬溶酶体的形态及数量的变化。结果:1.临床研究:（1）血清S-100 β蛋白:与术前1天比较,术后1天、3天时两组患者血清S-100β蛋白浓度明显升高（P＜0.05）;与C组比较,术后1天、3天时,E组患者的血清S-100β蛋白浓度明显更低（P＜0.05）。（2）认知相关评分:与术前1天比较,术后1天时两组患者的MMSE评分及MoCA评分均明显降低;与C组比较,术后1天、3天时,E组患者的MMSE评分及MoCA评分均明显更高,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。（3）术后认知功能障碍的发生率:与C组比较,E组患者术后认知功能障碍的发生率明显更低,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.实验研究:（1）与C组比较,M组大鼠表现穿越平台次数明显更少,M组大鼠的总路程明显更长（P＜0.05）;与M组大鼠比较,E组及CQ组大鼠穿越平台次数明显增多,总路程也明显缩短（P＜0.05）。（2）Western blot检测结果显示,与C组比较,M组大鼠的LC3-Ⅱ、Beclin-1、P62以及p-AMPK/AMPK 比值升高（P＜0.05）;与M组比较,E组大鼠的LC3-Ⅱ、Beclin-1、P62以及p-AMPK/AMPK 比值均明显下降（P＜0.05）;加入氯喹后,与E组比较,CQ组大鼠LC3-Ⅱ及Beclin-1水平明显降低（P＜0.05）,p62水平稍有升高,p-AMPK/AMPK水平进一步下降（P＜0.05）。（3）电镜下观察自噬体及自噬溶酶体的结果显示,各组大鼠海马组织均有自噬发生。与C组比较,M组自噬体数量明显增加,部分区域可见自噬溶酶体;与S 比较,E组大鼠海马组织自噬体数量明显减少,自噬溶酶体数量减少;与E组比较,CQ组自噬体数量进一步减少,自噬溶酶体数量无明显变化。结论:1.临床研究:电针预刺激“大椎穴”、“百会穴”可有效减轻老年胃肠道开腹手术患者术后神经损伤,改善术后早期认知功能,有利于降低术后认知功能障碍的发生率,安全可靠。2.实验研究:电针预刺激可通过抑制大鼠海马神经元过度自噬,改善老龄大鼠术后认知功能,此过程可能通过调控AMPK自噬通路完成。
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