RNA干扰对5637膀胱癌细胞survivin基因表达的研究

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目的:研究干扰RNA(RNAi)对5637细胞survivin基因表达的干扰效应。方法:化学合成survivin序列特异性双链RNA(dsRNA),用Lipofectamrne2000转染5637细胞,采用定量PCR检测survivin基因的表达,用流式细胞仪检测Annexin v标记的凋亡细胞。结果:序列特异性dsRNA-survivin可显著抑制suvivin基因在转录水平上的表达,与阴性对照组相比,在浓度为40nmol/L的dsRNA-survivin转染5637细胞24,48小时后survivin mRNA表达的抑制率分别为29%和53%,在浓度为100nmol/L的dsRNA-survivin转染5637细胞24,48小时后suvivin Mrna表达的抑制率分别为46%和86%,suvivin基因表达的抑制与5637细胞的凋亡相关联。结论:survivin的siRNA在膀胱癌5637细胞中有较高的转染效率;当survivin的siRNA浓度为100 nmol/L,转染48小时后,干扰效率高达86%,并且5637细胞凋亡明显增多, survivin mRNA表达明显下调,可望成为膀胱癌基因治疗的新途径。
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