天麻多糖分离纯化及理化性质研究

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本文以云南野生天麻(Gastrodia elata Blume)为实验对象,对其中多糖的分离纯化及基本理化特性进行了研究,获得如下结论。(1)水提(溶)天麻多糖(Water-soluble PGB,WPGB)的单因素实验和正交试验研究中研究发现:浸提温度是影响天麻中水溶性多糖得率的极显著性因素,浸提时间对水提天麻粗多糖得率有显著性影响。水提天麻粗多糖提取的最佳工艺条件为温度50℃,浸提时间3h,料液比1:10,乙醇浓度80%。在该条件下水提天麻粗多糖得率约为9.67%(干重)。(2)分别采用0.1、0.2、0.5 mol.L-1NaOH溶液浸泡法从水浸提天麻多糖操作剩下的不溶残渣中提取碱溶性多糖发现:天麻中的碱溶性多糖的含量较少。碱提(溶)天麻多糖(Alkali-soluble PGB,APGB)的低得率不利于对其进行进一步的深入研究,因此本实验对其不做研究。(3)天麻水溶性多糖(WPGB)经热水浸提,Sevag法脱蛋白,透析,乙醇沉淀,DEAE—纤维素及Sephadex G-100色谱分离纯化得到三种组分,其中WPGB-W(WPGB—Water elution part1)1和2为非酸性组分,且WPGB-W1比WPGB-W2的极(亲水)性略强:而WPGB-A(W PGB—Alkali elution part)为酸性组分。对这个酸性组分集中收集,并进行下一步的Sephadex G-100柱层析,分离出WPGB-A-H和WPGB-A-L,经高效液相色谱仪和Sephadex G-100凝胶柱分析证明WPGB-A-H为纯品,且得率为0.824%(干重)。(4)经定性化学反应鉴定表明WPGB-A-H不含蛋白质、核酸、糖醛酸,为非淀粉类中性纯多糖,其重均分子量分别为28840 Dal。WPGB-A-H的比旋光度[α]22D为+206.3(C=0.003,H2O),结合旋光度和红外光谱图证明WPGB-A-H为α-型右旋糖,糖环构型为吡喃型。气相色谱分析发现WPGB-A-H的单糖由D-葡萄糖、D-甘露糖两种单糖组成。根据各组分的峰面积比较可知,WPGB-A-H中D-葡萄糖较多,D-甘露糖较少。本实验对天麻中多糖的分离效率、得率以及纯化过程进行全面研究,得到了一条分离纯化天麻多糖的详细的工艺路线;对得到的天麻多糖纯品进行了系统全面的理化性质研究,为开发利用天麻多糖提供了基础研究资料,将有助于天麻多糖的各方面深入研究。
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