苯酚降解菌的分离、鉴定及其固定化研究

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通过对采自贵阳市乌当区某造纸厂的样品进行富集、筛选、纯化,最终分离得到了两株降酚效果较好的菌株。经驯化之后,二菌株均可在含酚浓度为1.0g/L的合成废水中生长并降解其中的酚,二菌株的混合菌株可降解含苯酚浓度高达1.3g/L合成废水中的苯酚。根据形态特征和生理生化特征将这两株降酚菌株初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas)和醋杆菌属(Acetobacter)。研究了温度、pH值、苯酚浓度、NaCl浓度、碳源、氮源、以及重金属离子等因素对苯酚生物降解的影响。发现二降酚菌株均可在20-50℃的范围内生长,但是以30℃时的降酚效率最高;随pH值的升高,苯酚的去除率也随之升高,但因合成废水中沉淀严重,所以,选择pH7.0为二菌株降解苯酚的最佳条件;在苯酚浓度低于1.3g/L的合成废水中,二降酚菌株均可生长,但是菌株降解苯酚的速率随合成废水中苯酚浓度的升高而逐渐降低;随NaCl浓度的升高,系统的降酚能力逐渐下降;此外,通过实验还发现,最佳的降酚氮源为NH4NO3;添加葡萄糖对合成废水中苯酚的生物降解没有促进作用;Cu2+、Co2+、Zn2+、Mn2+等重金属离子对苯酚的降解效率影响不一,其中,CB2+和Co2+对菌株的降酚作用有延迟乃至毒害作用,而Zn2+、Mn2+对菌株的降酚作用影响不明显。以海藻酸钠为包分埋剂,CaCl2为交联剂,用包埋法对5#耐酚菌株进行固定化,通过三因素三水平的正交实验筛选出固定化的最佳条件:交联剂浓度为2%(w/v),包埋剂与菌悬液比为20:1(v/v),交联时间为24h。与游离细胞的降酚相比,固定化细胞可以在36h内把含酚浓度为1.0g/L的合成废水中的酚降解掉;在含盐浓度为2%和3%中的降酚率明显提高;可以把除NH4NO3外的NH4Cl和(NH42SO4等铵盐作为较好的降酚氮源;对Cu2+的抗性明显增强,而对其他重金属的抗性不明显。
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