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目的:扶正固本颗粒多年来在临床使用,具有良好的临床疗效基础,其功效为凉血解毒,益气养阴。用于治疗肿瘤患者放,化疗后气阴两虚兼热毒证,临床上常与化疗药联合使用。以扶正固本颗粒对荷瘤小鼠的免疫功能增强作用的药效学实验的初步研究结果为基础,为了进一步加深其对免疫及造血功能的影响的探究,达到一方面指导临床合理用药,另一方面扩展其市场应用的目的。方法:1.按说明书的方法把细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中缓冲1.5小时后,待其恢复细胞基本生长状态后,将整瓶细胞及培养液按步骤分批离心并换液,待细胞生长完全后开始传代,传代时将离心机转速设定为1000rmp时间5min,将所有细胞培养液离心,收集细胞待用。2.把收集的S180腹水瘤细胞用生理盐水稀释5倍后,抽取1mL进行小鼠腹腔注射,待腹水生长完全,将小鼠脱臼处死后,用酒精棉球擦拭消毒,用5mL注射器抽取第三代腹水以1000rmp/5min离心条件,将所有腹水分别离心后,用移液枪收集S180细胞,多余的放入-80℃冰箱中待用,把腹水瘤细胞和生理盐水混合调至1x107mL-1浓度,在小鼠右腋部皮下接种0.2ml,每日观察肿瘤生长情况。肉眼观察及手触判断造模是否成功,造模全部成功,死亡率为0%3.接种次日将荷瘤小鼠随机分为5组,分别为模型组,化疗组,化疗联合扶正固本（低、中、高）剂量组。空白组不作任何处理,模型组:予以等体积蒸馏水灌胃给药;化疗组:腹腔注射顺铂注射液(1 mg·kg-1)。化疗（顺铂注射液）+扶正固本颗粒（低、中、高）剂量组:腹腔注射顺铂注射液(1mg·kg-1)联合灌胃给药扶正固本颗粒(5.625,11.25,22.5g·kg-1)。连续给药14天后,对S180荷瘤小鼠的一般情况、体重变化、抑瘤率、胸腺、脾脏指数进行观察,使用流式细胞仪对荷瘤小鼠外周血中的CD4、CD8水平及T细胞免疫中主要的T细胞亚群细胞水平及其平衡进行观察。使用外周血细胞计数仪对小鼠外周血细胞进行计数,电镜下通过血细胞计数板对骨髓造血干细胞数量检测,再对股骨进行病理学切片,并对其造血功能进行观察。4.基于TMT标记、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术,对上述实验中模型组（M）,顺铂组（S）,顺铂联合扶正固本高剂量组（Fg）小鼠的右侧股骨骨髓蛋白进行检测,根据不同的肽段进行液相色谱-质谱联用分析,查询GO数据库,京都基因百科全书数据库,InterPro数据库后,进行蛋白功能和富集分析,查询相关文献挖掘其生物意义,找出改善顺铂所产生副作用的特定蛋白及相关通路,进一步探明扶正固本颗粒对化疗后荷瘤小鼠副作用的逆转机制。结果1.一般情况除空白组外,各组荷瘤小鼠均造模成功且出现不同程度的活动受限,模型组皮毛疏密及光泽程度与空白组无明显变化,单纯顺铂组小鼠瘤体缩小明显,活动受限较模型组好,但毛色暗淡,无光泽且皮毛稀疏,联合给药组毛色光亮,皮毛紧实,活动较模型组好,实验过程中未见死亡。2.主要药效学2.1对体重、瘤重、抑瘤率的影响扶正固本颗粒各剂量联合化疗组体重均显著增加（P<0.01）,与模型组相比顺铂组、扶正固本颗粒（低、中）剂量组对瘤重的影响有显著性差异,有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,与顺铂组相比,高剂量组对瘤重的影响无显著差异。2.2对荷瘤小鼠免疫功能的作用与单纯化疗组比较,化疗组联合扶正固本颗粒（中、高）剂量组的胸（脾）脏指数均显著升高,有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。扶正固本颗粒（中、高）组联合化疗小鼠血液中CD8的水平显著下降,差别有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,扶正固本颗粒（中、高）剂量联合化疗能明显升高小鼠血液中CD4的水平,差异有统计学意义（P<0.01）。扶正固本颗粒（中、高）组联合化疗能明显升高小鼠血液中Th1,Th17含量（P<0.05或P<0.01）,扶正固本颗粒高剂量联合化疗小鼠血液中Th17、Treg含量显著下降（P<0.05）,扶正固本颗粒各剂量组联合化疗能明显升高小鼠血液中Th1/Th2水平（P<0.05或P<0.01）,扶正固本颗粒高剂量联合化疗小鼠血液中Th17/Treg水平显著上升（P<0.01）。2.3对荷瘤小鼠造血功能的作用与模型组比较,化疗组小鼠血液中外周血中红细胞数量显著减少（P<0.05）,与化疗组比较,扶正固本颗粒高剂量组联合化疗组小鼠外周血中红、白细胞、血小板数量都有不同程度的增加（P<0.01）。与模型组比较,化疗组小鼠骨髓中造血干细胞数量显著减少（P<0.01）;与化疗组比较,扶正固本颗粒高剂量联合化疗小鼠骨髓中造血干细胞数量显著增加（P<0.01）。与模型组比较,化疗组小鼠骨髓腔中造血组织容量显著减少（P<0.01）、脂肪容量显著增加（P<0.01）;与化疗组比较,扶正固本颗粒（中,高）剂量组联合化疗小鼠骨髓腔中造血组织容量显著增加（P<0.01）;脂肪组织容量显著减少,有统计学意义（P<0.01）。3扶正固本颗粒联合顺铂对小鼠股骨骨髓的蛋白质组学研究一共检测到331667个蛋白,其中定性的有5954个,定量的有5466个,模型组（M）和顺铂组（S）相比共有383个差异蛋白,扶正固本组（FG）和顺铂组（S）相比共有104个差异蛋白。生物信息分析显示,顺铂组较模型组通过atp6V0c,atp6v1g1,atp2a1等蛋白对肌球蛋白复合物调节,控制肌原纤维收缩、组成染色体等通路有显著的功能差异;扶正固本高剂量联合顺铂组与单纯顺铂组在mRNA信号序列复合物与SRP信号因子结合、诱导凋亡DNA断裂修复等通路有显著的功能差异。质谱验证结果显示扶正固本颗粒可通过调控poll、Timeless、Rps27a、chd2、Hist1h1a、Hist1h1d等蛋白表达参与DNA双链断链修复减少使用顺铂产生DNA水化的副作用的机制,从而修复免疫和造血损伤。结论:1.扶正固本颗粒有效改善荷瘤小鼠的一般状态。2.扶正固本颗粒（中,高）剂量联合顺铂能提高胸腺（脾脏）指数、荷瘤小鼠CD4+、降低CD8+含量水平,有利于动物体内T细胞亚群增殖作用,其中扶正固本颗粒高剂量联合顺铂组能显著提高Th1/Th2,Th17/Treg比值,以提高整体T细胞免疫功能。3.扶正固本颗粒高剂量组联合化疗药顺铂,实验结果提示扶正固本颗粒高剂量能明显逆转顺铂导致的骨髓抑制。4.蛋白组实验结果显示扶正固本颗粒能通过调节DNA修复蛋白（poll）修复顺铂导致的副作用,降低顺铂通过调节atp6V0c,atp6v1g1,atp2a1等蛋白对肌球蛋白复合物的调控,进而发挥控制肌原纤维收缩的作用。