论文部分内容阅读
研究背景、目的：心肌梗死导致了心肌重塑，室壁变薄，心室扩张，心肌肥大和心力衰竭，是引起死亡的首要原因。心肌细胞和细胞外基质（ECM）间的协同作用有利于保持心肌的正确排列，以维持心脏正常的结构和功能。ECM表达受多种因子的调节。阻止心肌梗死后ECM重塑可能有助于改善MI的预后和心功能。目前很少有MI后梗死区和非梗死区ECM表达的报道。因此本研究旨在：①研究心肌梗死后大鼠不同时间点ECM表达和心功能的动态变化；②检测梗死区TGF-β1及其受体表达，以及TGF-β1与ECM表达的相关性；③观察Enalapril，Losartan,Losartan/Hctz在干预ECM重塑和改善心功能的作用。方法：1. （1）结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型为MI组，并设假手术组；（2）术后3d,7d,14d,28d,56d插管行血液动力学指标检测；（3）放免法检测术后7d、56d血浆和非梗死区心肌AngII以及血浆ALD 的水平；（4）ECM成分（含I、III型胶原，FN，LN）、TGF-β1和受体TGFβRI、TGFβRII采用免疫组化和图象分析<WP=7>法检测；并测定I/III型胶原比值；（5）采用H.E染色和苦味酸-天狼猩红染色观察心肌组织结构改变，电镜观察心肌超微结构。 2.将MI后大鼠随机分为4组： MI组；Enalapril组(5mg.kg~-1.d~-1)；Losartan组(20mg.kg~-1.d~-1);Losartan/Hctz组(20mg.kg~-1.d~-1)进行干预7d、56d,分别检测上述指标的变化（仅MI组和Losartan组检测TGF-β1和受体蛋白表达）。 结果：（1） MI后梗死区和非梗死区I、III型胶原含量随时间增加均显著增加，在3d, 7d,14d, 28d, 56d较sham组高（p<0.05, P<0.01）。梗死区以I型胶原增生为主；非梗死区早期以III型胶原增生占优势，晚期以I型胶原增生为主。Enalapril，Losartan，Losartan/Hctz干预后I、III型胶原和I/III比值显著下降，三组间无显著性差异。（2）MI后3d~14d 梗死区FN，LN表达急剧性增加,以后呈现出缓慢性增加，均较sham组高（p<0.01）。Enalapril，Losartan，Losartan/Hctz干预能显著降低二者的表达。（3）在3d MI组血浆中AngII，ALD水平明显增加（P<0.05， P<0.01 ），而局部AngII略有增加（P>0.05）；56d时上述指标均显著增加（P<0.01）。L组和L/H组血浆和局部AngII以及血浆ALD水平明显增加（P<0.05，P<0.01）；E组上述指标显著下降（P<0.05, P<0.01），较sham组略高。（4） TGF-β1 、TGFβRI、 TGFβII与ECM重塑具有相关性。梗死区蛋白表达急剧增加，显著高于sham组。Losartan干预能显著减少梗死区TGF-β1 、TGFβRI、 <WP=8>TGFβII蛋白表达。TGF-β1与I、III型胶原表达呈正相关（r1=0.845， r2=0.838）。（5） MI组梗死区心肌细胞坏死，心肌纤维排列紊乱，成纤维细胞增生，被瘢痕组织替代。电镜下发现：肌丝溶解，内质网扩张和空泡化，线粒体肿胀，髓样结构，胶原增生。Enalapril,Losartan,Losartan/Hctz干预后上述病理结构有不同程度改善。（6）与sham组比较，心肌梗死后不同时期LVSP、+dp/dtmax明显减低，而LVEDP上升（p<0.01）；Enalapril,Losartan,Losartan/Hctz干预后能有效改善心功能，Losartan/hctz较Enalapril更能有效降低LVEDP。结论：（1）MI后ECM发生重塑，梗死区发生修复性纤维化，非梗死区发生反应性纤维化。（2） ECM重塑导致左室心功能的恶化；（3） TGF-β1，TGFβRI，TGFβRII在MI后ECM重塑过程中起重要作用； I，III型胶原蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈正相关；（4）Enalapril,Losartan,Losartan/Hctz干预均能抑制ECM的重塑，改善心功能。Losartan/hctz较Enalapril更能有效降低LVEDP，但机制不清。