论文部分内容阅读
【目的】通过检测低剂量辐射后不同放射敏感性小鼠外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点,明确不同品系小鼠外周血淋巴细胞DSB修复能力的差异,并探讨其与发生放射性肺损伤的相关性。 【方法】给予三种放射敏感性不同的近交系小鼠(BALB/c、C57BL/6和SCID小鼠)全身低剂量照射(0.1-2Gy),照射后不同时间点(0.5h、2h、4h和8h)心脏取血并分离淋巴细胞,通过细胞免疫荧光计数核内γ-H2AX焦点;建立急性放射性肺炎和放射性肺纤维化模型,予三品系小鼠全胸照射(8Gy、10Gy、12Gy),照射后第8周分离肺组织,通过HE染色比较不同品系小鼠放射性肺炎期肺组织形态学差异,ELISA分析血浆细胞因子TGF-β1、TNF-α、IL-6水平差异;照射后第24周分离肺组织,分别通过westernblotting和实时定量PCR检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原在蛋白及mRNA表达水平的差异,并通过Masson染色形态学比较肺组织中胶原蛋白的沉积。 【结果】γ-H2AX焦点代谢动力学能够反应三种品系小鼠电离辐射后外周血淋巴细胞DSB产生和修复的差异(P<0.05);SCID小鼠在放射性肺损伤模型的观察期间全部死亡,在形态学上BALB/c小鼠肺组织炎性变化较C57BL/6小鼠明显,肺组织破坏严重;然而不同品系小鼠间细胞因子水平没有明显差异(P>0.05);在放射敏感性不同的小鼠中肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达均随照射剂量增加而增加,并且相同照射剂量下BALB/c小鼠的表达明显高于C57BL/6小鼠;另外可以发现BALB/c小鼠的肺组织Masson染色切片中大面积蓝色胶原纤维,而相同照射剂量下C57BL/6小鼠胶原纤维沉积明显减少。 【结论】低剂量辐射后小鼠外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点分析能够有效识别电离辐射后DSB修复具有遗传缺陷的个体,预测放射性肺损伤的发生及严重程度,对临床上放射治疗的个体化具有指导意义。