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近年来,食品中的功能性成分成为了一个重要的研究领域,其中的生物活性多肽,特别是一些蛋白质中的小分子量多肽的功能特性越来越受到人们的广泛关注。乳源生物活性多肽是乳蛋白通过体内胃肠消化或体外蛋白酶解后得到的具有生物活性的小的氨基酸序列。经大量研究文献佐证,这些生物活性多肽具有诸如降血压、提高免疫力、促进消化、抗氧化、神经调节和抗菌等生物活性。现阶段各类炎症疾病困扰着人们的日常生活,但很少有研究报道关于初乳及发酵乳中的多肽成分的抗炎作用,本研究对牛羊初乳和不同菌种发酵的牛羊发酵乳经过模拟人体消化后利用AKTA purifier10蛋白质层析仪进行功能性多肽分离纯化及比较,同时应用小鼠肿瘤坏死因子TNF-α ELISA及Westernblot对所分离出的多肽进行抗炎作用分析与比较,最后应用液相色谱-质谱联用对所选最优抗炎性的多肽做氨基酸序列分析及分子量测定。为抗炎功能性食品的开发提供参考。主要结论如下:(1)羊初乳中分离出的多肽种类多于牛初乳;同时添加了嗜酸乳杆菌和双歧杆菌的复合菌种发酵乳中分离出了最多种类的多肽,且羊发酵乳中多于牛发酵乳。从牛初乳中分离出了23种多肽,从羊初乳中分离出了36种多肽。用普通菌种发酵的牛羊酸乳中的多肽种类少于添加了益生菌发酵的牛、羊发酵乳,普通羊酸乳中分离出多肽3种,普通牛酸乳中1种,嗜酸乳杆菌牛发酵乳中2种、羊发酵乳中4种,双歧杆菌牛发酵乳中2种、羊发酵乳中3种。(2)通过小鼠肿瘤坏死因子TNF-α ELISA的抗炎性能检测,乳样品中分离出的多肽均具有抗炎作用。牛羊初乳样品中小鼠肿瘤坏死因子TNF-α的浓度范围是(2.42±0.006)~(18.03±0.102) ng/L;牛羊发酵乳样品中小鼠肿瘤坏死因子TNF-α的浓度范围是2.18±0.069ng/L~14.03±0.081ng/L。(3)通过Western blot对所分离出的多肽进行抗炎性验证比较,可知羊初乳第三天中含有的一种多肽C3-1显示出最好的抗炎性能;同时添加了嗜酸乳杆菌和双歧杆菌的复合菌种的羊发酵乳中含有的一种多肽C①-2显示出最好的抗炎性能。(4)应用液相色谱-质谱联用对所选最优抗炎性的多肽做分子量测定及氨基酸序列比对。由TNF-α ELISA分析和Western blot验证所优选的牛初乳第三天第一种多肽B3-1的氨基酸序列可能为FQSEEQQQTEDELQDK,其分子量为1983Da,其可能来源于牛乳蛋白β-CN的前体;所优选的羊初乳第三天第一种多肽C3-1的氨基酸序列可能为VYVEELKPTPEGNLEILLQK,其分子量为2315Da,其可能来源于羊乳蛋白β-乳球蛋白。所优选的嗜酸乳杆菌牛发酵乳多肽B②-1的氨基酸序列可能为HQGLPQEVLNENLLR,其分子量为1761Da,其可能来源于牛乳蛋白α-S1-CN的前体;所优选的四种菌种复合羊发酵乳多肽C①-2的氨基酸序列可能为SPAQTLQWQVLPNTVPAK,其分子量为1979Da,其可能来源于羊乳蛋白κ-CN。