【摘 要】
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该文以人胎盘组织为原料,通过胃蛋白酶消化,并经多次离心,最后通过DEAE-52纤维素柱进行NaCl梯度过滤,提取出Ⅳ型胶原纯品.用纯化的Ⅳ型胶原免疫家兔,得到了滴度为1:100,000的
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该文以人胎盘组织为原料,通过胃蛋白酶消化,并经多次离心,最后通过DEAE-52纤维素柱进行NaCl梯度过滤,提取出Ⅳ型胶原纯品.用纯化的Ⅳ型胶原免疫家兔,得到了滴度为1:100,000的抗血清.抗血清经(NH)<,4>SO<,4>沉淀法精提纯后,又经Sephadex G200凝胶过滤法进一步提纯,得到了高特异性的抗体.用氯胺T法标记纯化的Ⅳ型胶原,制成<125>I标记物;以纯化的Ⅳ型胶原溶解在标准缓冲液中配制出标准品;将提纯后的抗体以1:32000比例稀释后配成抗体溶液;并以双抗-PEG6000作为沉淀剂开发出了Ⅳ型胶原放射免疫分析试剂盒.用该试剂盒对各类肝病病人血清测定后表明,血清Ⅳ型胶原水平以慢性肝炎(CH)重度、肝硬化(LC)及肝细胞癌(HCC)为最高,与正常人相比有统计学意义.急性肝炎(AH)及脂肪肝(FL)的Ⅳ型胶原含量无明显变化.肝细胞癌术后(HCC)的血清Ⅳ型胶原增高不明显.肝组织纤维化程度与Ⅳ型胶原的血清水平也有一定关系,在肝纤维化的各个时期中,Ⅳ型胶原水平不一,S2期Ⅳ型胶原明显升高,与正常人比较有统计学意义.而对甲状腺病人的测定结果表明:甲亢现症患者(治疗前)的Ⅳ型胶原水平显著高于正常对照组和其它甲状腺疾病组;其他甲状腺疾病组Ⅳ型胶原的测定结果与正常对照组比较无显著性差异.
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