论文部分内容阅读
【目的】:比较胃癌肿瘤干细胞CSC-G和普通胃癌细胞SGC7901的生物学特性,来阐明肿瘤干细胞在胃癌侵袭、转移中的作用;并研究CSC-G的血管形成能力,来探讨肿瘤干细胞在肿瘤血管生成过程中的重要性。【方法】:通过Real-time PCR、Western-blot以及细胞免疫组化,检测CSC-G细胞与SGC7901细胞中干细胞标志基因OCT4、SOX2、c-Myc和Klf4的表达水平;进行球形克隆形成实验、平板克隆实验、Transwell侵袭性实验和裸鼠成瘤实验,检测CSC-G细胞与SGC7901细胞的致瘤性、侵袭性;检测CD44、E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平,比较两组细胞的转移能力;通过MTS实验,检测两组细胞对L-OHP和5-FU的耐药性;利用细胞划痕实验、Transwell迁移实验和成环实验,检测CSC-G细胞与SGC7901细胞的血管形成能力。【结果】:Real-time PCR结果显示,CSC-G中OCT4、SOX2、Klf4和CD44的mRNA相对表达量与SGC7901组相比显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05),而c-Myc mRNA相对表达量两者差异无统计学意义(P>0.05),CSC-G组E-cadherin的mRNA相对表达量低于SGC7901组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western-blot及免疫组化结果与Real-time PCR结果相符。球形克隆实验和平板克隆实验提示CSC-G细胞形成的克隆球数量多于SGC7901细胞组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验和细胞划痕实验结果提示,CSC-G细胞的迁移和侵袭能力高于SGC7901细胞组,差异有统计学意义(P<0.05)。MTS实验结果示,CSC-G细胞对化疗药物L-OHP和5-FU的IC50均高于SGC7901细胞组,差异有统计学意义(P<0.05)。裸鼠成瘤实验结果提示,CSC-G细胞的体内成瘤能力与SGC7901细胞组相比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。成环实验结果示CSC-G所形成的环数多于SGC7901组,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】:胃癌肿瘤干细胞的侵袭力、致瘤性及耐药性明显高于普通胃癌细胞,而且具有较强的迁移能力和血管形成能力。因此,胃癌肿瘤干细胞的存在可能是胃癌复发、转移及耐药的机制之一。而且CSC-G具有明显的迁移能力与血管形成能力,提示肿瘤干细胞可能通过形成血管能力来促进胃癌的发生和发展。