目的本研究主要从细胞水平探讨整合素αvβ5在高糖/oxLDL状态下诱导HLSECs功能障碍的分子机制及相关信号途径。方法体外培养HLSECs并用葡萄糖(25mM,24h)/ox-LDL(100μg/ml,24h)处理,分别使用αvβ5抑制剂RGDfv,FAK抑制剂DF228,ERK抑制剂PD98059进行干预。MTT比色法用于检测HLSECs活力并确定实验分组;采用RT-PCR,Western blotting和免疫荧光技术检测整合素αvβ5,FAK,ERK,VN的表达水平;扫描电子显微镜检测葡萄糖/ox-LDL对HLSECs的影响。采用SPSS21.0软件对实验数据进行统计学分析。结果1.葡萄糖或oxLDL作用下,整合素αv,整合素β5,FAK,ERK,VN的表达均以时间及浓度依赖方式增加,且在葡萄糖浓度25mM,24h,oxLDL浓度100μg/ml,24h时升高最明显,此时的细胞活力最强。两者同时作用时升高更为显著(P<0.05)。2.使用整合素αvβ5抑制剂RGDfv对各组细胞进行干预时,ERK,FAK及VN的表达下调。使用FAK抑制剂DF228干预HLSECs,ERK及VN的表达下调,但整合素αvβ5的表达没有显著变化。使用ERK抑制剂PD98059干预HLSECs,VN的表达下调,而整合素αvβ5、FAK的表达未见明显变化(P<0.05)。3.扫描电子显微镜下观察葡萄糖/oxLDL作用下的HLSECs发现,正常对照组HLSECs窗孔较多且基底膜不连续,而高糖/ox-LDL组HLSECs相比正常对照组,窗孔数量明显减少、直径明显减小(P<0.05)。结论在高糖/ox-LDL状态下,整合素αvβ5通过FAK/ERK信号通路调节VN的表达诱导肝窦内皮细胞功能障碍,进而促进肝窦毛细血管化。整合素αvβ5可能是预防和治疗糖尿病合并脂肪肝的潜在靶点。