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帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,其主要病理改变是中脑黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNpc)多巴胺(dopamine,DA)能神经元脱失及伴发的纹状体(striatum,Str)轴突末稍DA的耗竭。流行病学调查显示PD的发病率具有明显的性别差异,男性高于女性。这与性腺类固醇激素尤其是雌激素对脑内DA能神经元的调控作用有关。但雌激素替代治疗的副作用,限制了其在临床的长期应用。大豆异黄酮是典型的植物雌激素,genistein是其主要的活性成分,其结构和功能与雌激素非常相似。但genistein对帕金森病模型动物中脑DA能神经元是否具有保护作用及其作用的机制目前尚不清楚。目的:研究genistein对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)或6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)制备的去卵巢(ovaryectomy,OVX)PD模型小鼠或大鼠黑质(substantia nigra,SN)多巴胺能神经元的保护作用及其机制探讨。方法:应用MPTP制备的OVX PD模型小鼠,腹腔给予genistein或雌激素预处理,采用免疫组织化学染色检测SNpc酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(tyrosinehydroxylase-immunoreactive,TH-IR)神经元和Bcl-2蛋白的表达;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠黑质TH、多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)和Bcl-2基因的表达;高效液相色谱法检测小鼠Str DA及其代谢物二羟基苯乙酸(dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)和高香草酸(homovanillic acid,HVA)的含量。应用6-OHDA内侧前脑束(medial forebrain bundle,MFB)两点注射法制备OVX PD模型大鼠,侧脑室注射genistein或雌激素,采用免疫组织化学法检测SNpc TH-IR神经元和Bcl-2蛋白的表达;Perls’铁染色观察SN内铁含量的变化。结果:1.MPTP模型组与对照组相比,SNpc TH-IR神经元数目、TH和DAT mRNA表达明显降低,差别有统计学意义(P＜0.01);genistein或雌激素预处理组,SNpc TH-IR神经元数目、TH和DAT mRNA表达较MPTP模型组明显增多(P＜0.01)。2.MPTP模型组Str内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量较对照组明显降低,genistein或雌激素预处理组Str内DA、DOPAC和HVA的含量较MPTP模型组均明显增加,差别有统计学意义(P＜0.01)。3.MPTP模型组与对照组相比,SN区Bcl-2蛋白和mRNA表达明显减少,差别有统计学意义(P＜0.01);genistein或雌激素预处理组,SN区Bcl-2蛋白和mRNA表达较MPTP模型组明显增多(P＜0.05)。4.6-OHDA模型组损毁侧与对照组相比,SNpc TH-IR神经元数目明显减少,差别有统计学意义(P＜0.01);genistein或雌激素给药组,损毁侧SNpc TH-IR神经元数目较模型组明显增多(P＜0.01)。5.6-OHDA模型组损毁侧与对照组相比,SN区铁染色阳性细胞数目明显增多,差别有统计学意义(P＜0.01);genistein或雌激素给药组,损毁侧SN区铁染色阳性细胞数目较模型组明显减少(P＜0.01)。6.6-OHDA模型组损毁侧与对照组相比,SN区Bcl-2蛋白表达明显减少,差别有统计学意义(P＜0.01);genistein或雌激素给药组,损毁侧SN区Bcl-2蛋白表达较模型组明显增多(P＜0.01)。结论:Genistein对MPTP诱导的OVX PD模型小鼠及6-OHDA诱导的OVX PD模型大鼠SN内DA神经元均具有明显的保护作用,其保护机制可能与genistein具有的抗凋亡、抗氧化应激等类雌激素样作用有关。该研究结果为genistein防治PD提供了直接的实验依据和可能的干预措施,具有重要的理论意义和应用开发价值。