【摘 要】
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目的:观察共刺激分子阻断剂CD80mAb、CD40LmAb 在协同imDC 诱导同种异体大鼠胰十二指肠移植免疫耐受中的作用。方法:经静脉途径给予三种不同剂量（45mg/kg 、50mg/kg 、55mg/kg）的四氧嘧啶,观察用药后血糖变化及大鼠存活情况;以糖尿病大鼠为受体,采用进腹后立即用输液器连续滴注法（60 滴/min）灌注后取供体,显微镜下左肾静脉-门静脉袖套吻合、腹主动脉端侧吻合建立同种
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目的:观察共刺激分子阻断剂CD80mAb、CD40LmAb 在协同imDC 诱导同种异体大鼠胰十二指肠移植免疫耐受中的作用。方法:经静脉途径给予三种不同剂量（45mg/kg 、50mg/kg 、55mg/kg）的四氧嘧啶,观察用药后血糖变化及大鼠存活情况;以糖尿病大鼠为受体,采用进腹后立即用输液器连续滴注法（60 滴/min）灌注后取供体,显微镜下左肾静脉-门静脉袖套吻合、腹主动脉端侧吻合建立同种异基因大鼠胰十二指肠移植模型;4E5、1B1 两株杂交瘤细胞株BABL/C 小鼠腹腔注射,抽取腹水,分离纯化后获得CD80mAb、CD40LmAb;分离供体大鼠骨髓来源DC 细胞前体,经GM-CSF、IL-4体外刺激后,再加入IL-10 共培养,8 天后检测细胞表面共刺激分子及MHC 表达,鉴定是否为imDC;移植前7 天,将2×106imDC 经静脉途径注射至受体体内,同时分别给予NS 1ml、CD80mAb 5mg、CD40LmAb 5mg、CD80mAb+CD40L mAb各5mg,连续14 天,观察:1、大鼠移植后存活情况;2、移植后14 天大鼠移植胰十二指肠大体及镜下病理改变;3、供体的脾T 细胞为刺激细胞,受体移植后7、21 天脾细胞为效应细胞,混合淋巴细胞共培养（MLR）后,[3H]dTHR 释放试验检测宿主抗移植物反应;4、取混合淋巴细胞反应的上清液,检测Th1、Th2 细胞因子IL-2、TNF-γ和IL-10、IL-4 的浓度;5、移植7、21 天后受体血清IgG、IgM水平。结果:50mg/kg 经静脉途径给予四氧嘧啶能成功诱导大鼠糖尿病模型,一周后血糖浓度≥16.6mmol/L,成功率为93.3%;以糖尿病大鼠为受体建立同种异基因胰十二指肠模型,移植后24 小时存活率为92%,其中供体手术时间为40±min,热缺血时间1±1min;受体手术时间55±4min,冷缺血时间50±2min。移植前血糖浓度为28.3±1.7mmol/L,移植后血糖恢复至正常水平;4E5、1B1 杂交瘤细胞腹水提取的CD80mAb、CD40LmAb 的效价为1:1000,浓度分别为2.13mg/ml 和1.87mg/ml;IL-10 共培养的骨髓来源的DC 前体细胞共刺激分子和MHC 表达水平为31%、28%、28%,与对照组差异有显著性;联合使用CD80mAb 和CD40LmAb+DC组大鼠移植后存活时间延长,中位生存时间为92.03 天,而imDC+NS 组中位生存时间仅为12.69 天,有显著统计学意义;移植后14 天移植物病理学观察表明:实验组大鼠胰十二指肠轮廓尚清楚,胰腺小叶结构存在,胰腺腺泡少量破坏,可见淋巴细胞为主的炎性细胞浸润,少量纤维组织增生,十二指肠腺体和粘膜改变不明
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