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恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病，目前对肿瘤的发生机制还不清楚。但一些研究已表明肿瘤的发生与遗传素质、免疫功能、精神因素和环境有关，其中精神-神经-内分泌-免疫功能与肿瘤的关系比较密切。中医理论也认为长期抑郁、恼怒所致的肝郁情志因素刺激与肿瘤的发生有密切关系。根据以上理论，本实验采用化学诱癌剂二乙基亚硝胺(DEN)灌胃诱发大鼠肝癌，同时对大鼠采用限制活动的处理施加肝郁刺激，制备大鼠实验性肝癌肝郁证动物模型，并用四逆散加味对模型大鼠进行反证治疗，主要研究肝郁因素刺激对肿瘤发病的影响。采用丝裂原激活淋巴母细胞法测定IL-2能力、并检测大鼠脾细胞产生IFN—r能力、采用Griess法测定NO产生能力、MTT法检测T、B淋巴细胞增殖能力、同时检测巨噬细胞吞噬功能、流式细胞仪检测肝细胞DNA含量分布并用TRAP法(端粒酶重复序列扩增法)检测端粒酶活性，HE染色观察肝脏组织病理形态学改变。实验结果如下： 1、肝郁因素刺激对化学诱癌剂DEN诱发的实验性肝癌大鼠免疫功能的影响及加味四逆散的反证作用 在接受肝郁刺激9、14、18周模型大鼠的多个免疫学指标均表现为下降，病证结合模型组大鼠IL-2、IFN、山西医抖大学 硕士学位论文NO生成能力减低、T淋巴细胞在丝裂原刺激下增殖能力降低、巨噬细胞吞噬功能降低，表明该组动物免疫功能明显降低，经四逆散加味治疗后，上述指标多有明显改善。 二、肝郁因素刺激对DEN诱发的实验性肝癌大鼠肝细胞DNA含量分布影响及端粒酶活性影响及四逆散加味的反证作用 肝郁刺激可加重DEN诱癌导致的肝细胞二倍体数目增多，使4倍体肝细胞进一步减少。使DEN诱癌后端粒酶活性进一步增加，中药四逆散加味可降低端粒酶活性。 3、肝郁因素刺激对二乙基亚硝胺（DEN）诱发实验性肝癌大鼠肝脏组织病理形态学影响及加味四逆散的反证作用 病证结合模型组大鼠在肝郁刺激过程中表现出一般肝郁症状，易怒，互相撕咬扭打，后期抑郁少动。HE染色光镜观察发现病证结合组门管区炎症细胞浸润更多些，肝小叶周边纤维化更加严重。四逆散加味治疗对肝癌病理学有一定改善作用。 以上结果表明肝郁刺激可明显抑制实验性肝癌肝郁大鼠的免疫功能，使单纯诱癌导致的肝细胞二倍体数目增多进一步增加，同时使4倍体肝细胞数目进一步减少。使单纯DEN诱癌导致的端粒酶活性增加进一步增高，可加重化学诱癌剂DEN引起的肝脏病理形态学改变。四逆散加味治疗能调节模型大鼠免疫功能，降低端粒酶活性，对机体肿瘤的发生可能有一定预防和治疗作用。