猪丹毒丝菌又称红斑丹毒丝菌,是一种对哺乳动物、鸟类、爬行动物、鱼和人类都有危害性的致病菌,它能引起高热、败血症、皮肤病变、关节炎等问题。由该菌引起的猪丹毒在各个国家均有报道,对猪群的各个阶段均有较大威胁,近年来给我国猪产业带来严重损失,属于二类动物疫病。为了对新疆阿克苏地区猪丹毒病的防控和治疗提供科学依据,本实验无菌收集2020-2021年新疆阿克苏地区规模化猪场患关节炎、败血症、流产等疑似猪丹毒发病猪的病料,包含了病猪心、肝、脾脏、肾脏、皮肤疹块等。对病料进行细菌培养,观察长出的菌落形态,并经革兰染色镜检和电镜观察,观察到该细菌为革兰阳性细小或细长弯曲状杆菌。对其进一步分离纯化,提取细菌基因组,用细菌16S r RNA通用引物进行扩增,将扩增出来的目的片段与p MD19-T载体连接进行克隆、鉴定后提取质粒,送测序,经比对确定得到一株猪丹毒丝菌。为确定分离出的猪丹毒丝菌的药敏特性,对该株猪丹毒丝菌进行了药物敏感性试验,结果表明该分离菌株对β-内酰胺类药物中的十种表现为高度敏感;对磺胺类、硝基呋喃类以及两种氨基糖苷类药物表现为高度敏感。对林可胺类、四环素类、喹诺酮类、大环内酯类、多肽类、氯霉素类药物表现为不同程度的耐药。为进一步明确该菌株的耐药特性和致病性,对该菌株进行了全基因组测序,获得了大小为1913700bp的全长序列,并将其上传至NCBI,获得了基因登录号PRJNA816312,丰富了猪丹毒丝菌的全基因组数据库,同时对该菌全长序列进行了分析,明确了其耐药特性、毒力因子以及其他基因功能分析。猪丹毒丝菌的其中一个毒力因子表面保护性蛋白SPA,在致病性强的猪丹毒丝菌中表达量较高,但是很少在无致病力和致病性弱的菌株中表达,结构较为稳定,具有良好的免疫原性。为了对该场猪丹毒病的快速诊断和检测提供科学依据,本实验选取了猪丹毒丝菌的表面保护抗原SPA作为目的蛋白进行了研究。首先,进行Spa基因的克隆和序列分析,以分离猪丹毒丝菌的DNA为模板扩增其序列,构建重组质粒p MD19-T-Spa,经鉴定、测序,Spa基因大小为1530 bp。然后,进行SPA原核表达载体的构建及表达,将p MD19-T-Spa质粒DNA经Bam H和XhoⅠ双酶切后获得Spa基因片段,与表达载体连接后,转化克隆菌DH5α,提取重组质粒,经酶切鉴定和测序后,将重组质粒p ET-28a-Spa转化表达宿主菌E.coli BL21（DE3）中,经诱导1、2、3、4、5h,Spa的重组表达菌和对照菌,处理后的产物进行SDS-PAGE分析。结果显示:经IPTG诱导后表达菌DE3成功表达了目的蛋白,其大小与预期大小相同,为56.1KDa。