抗高效氯氰聚酯家蝇品系的交互抗性及其相关酶的活性研究

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本文以家蝇为实验对象,通过实验的前期准备,熟悉了家蝇的饲养方法及抗性培育方法,并采用点滴法性作为抗性培育及生物测试的方法。实验所用的家蝇敏感品系是山东疾病控制预防中心昆虫饲养室长期饲养的,抗性培育是从实验室内饲养的敏感品系(S)开始,所使用的杀虫剂为高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)。对抗性培育家蝇的采用点滴法进行抗药性倍数的测定后,并选择不同抗性水平的家蝇对其他三种杀虫剂进行抗性倍数的测定,以观察抗高效氯氰菊酯抗性家蝇对其他杀虫剂的交互抗性。实验观察记录了家蝇抗药性培育的结果;统计了不同抗性水平家蝇对其他三种杀虫剂的交互抗性的变化;并测量了不同抗性水平家蝇体内GSH-PX、AChE、SOD活性的变化,并对相关酶的同工酶的电泳谱带进行分析;观察了不同抗性水平家蝇的羽化率的变化;最后观察了不同杂交条件下对家蝇抗性衰减的影响。通过对家蝇品系26代的抗性培育,家蝇的抗性倍数从敏感品系(S),到F26代时抗性倍数达到152.9079,抗性家蝇抗性水平已经达到高抗水平,这对家蝇的防制产生了较大的困难。在家蝇的抗性培育过程中,分别对抗性选育的F5、F10、F16、F22和F26家蝇品系对溴氰菊酯(deltamethrin)、敌敌畏(DDVP)和残杀威(propoxur)3种杀虫剂的抗性倍数的测定。结果显示,抗高效氯氰菊酯家蝇在F26时抗性倍数增长了44.8196倍,存在明显的交互抗性;对DDVP的抗性倍数到F26时增长了8.7899倍,有交互抗性;对残杀威,抗性倍数保持在1倍左右,在F26时,抗性倍数最低,为0.6074倍,存在负交互抗性。由此可以得出,拟除虫菊酯类抗性家蝇对同类的药剂存在明显的交互抗性,对有机磷杀虫剂有一定的交互抗性,对氨基甲酸酯类杀虫剂存在负交互抗性。这些结果对于选用具有负交互抗性杀虫剂防制家蝇有指导作用。为检测抗性选育的家蝇品系对家蝇体内酶的作用,分别对不同抗性水平家蝇的GSH-PX、AChE和SOD三种酶进行了酶活的测定,结果显示,家蝇体内的三种酶的酶活均发生了较大的变化。GSH-PX随着家蝇抗性的增长,活性逐渐增强,在F26时达到最高,相对活性达到236.55%,其POD同工酶酶谱带颜色均有加深趋势,特别是PX3和PX4条带在F18达到最深,说明酶表达量增加,活性加强,因此可以看出GSH-PX作为重要的解毒酶系,活性增强与抗性的增长有关;AChE作为重要的靶标酶系,随着家蝇抗性的增高,AChE活性降低,因此表现为靶标不敏感,有利于降低杀虫剂的危害,在酯酶同工酶酶谱中,E1和E3颜色逐渐加深,而E5条带颜色变浅,甚至消失,说明酯酶同工酶结构性质有所改变;SOD作为昆虫体内重要保护酶系,家蝇的抗性增长的同时,SOD活性逐渐增强,到F26时到达最强,相对活性达到297.35%,活性增加了近3倍,SOD活性增强有利于消除家蝇体内氧自由基,达到保护作用,在SOD同工酶酶谱中,4条谱带颜色逐渐加深,与SOD活性变化相符。在本研究过程中,为观察家蝇的抗性增长对家蝇羽化率的影响,选取不同抗性世代家蝇测定其羽化率情况。结果显示,随着抗性的增高,家蝇的羽化率随之降低,羽化率从敏感品系的为91.33%,到F26时降到44.67%,下降率达到51.10%。说明家蝇抗性的增长是以羽化率降低为代价的,这也是抗性适合度的一个重要方面。此外,在抗性家蝇培育通过对第26代家蝇连续培养7代,观察每代家蝇在不同的杂交情况下抗性衰退情况。结果显示,敏感品系雌性家蝇与抗性品系的雄性家蝇杂交后抗性衰减最快,经过7代后抗性倍数降到2.2989,衰减率达到98.50%,基本接近敏感水平;抗性雌性家蝇与敏感雄性家蝇的杂交后衰减也较快,衰减率达到91.85%;在自然衰退状况下,抗性衰退稍慢,其衰减率也达到83.66%。结果说明,实验室培育的单抗品系,在无杀虫剂的选择压力下,抗性的衰退较快,因此在对防制家蝇的过程中,为防止抗性的产生,同一种杀虫剂的停用或换用其他杀虫剂有利于抗性的衰减,增加家蝇防制效果。
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