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目的：研究经RGD修饰的人内皮抑素(endostatin)N-端的30肽(1-30位氨基酸)对人膀胱癌T24细胞转移能力的影响。
方法：从课题组构建的内皮抑素30肽和27肽基因工程菌提取30肽和27肽。WST-1试剂检测30肽对T24胞增殖的影响，并计算出IC50。划痕实验检测30肽对细胞迁移能力的影响。Transwell实验检测30肽对细胞侵袭能力的影响。RT-PCR检测30肽对细胞MMP-2、MMP-9及TIMP-2的mRNA表达量的影响。明胶酶谱实验检测30肽对细胞MMP-2、MMP-9活性的影响。
结果：30肽具有比27肽更强的抑制人膀胱癌细胞T24增殖的作用。30肽对人膀胱癌T24细胞半数抑制浓度IC50为42.1μg/ml，显著低于27肽IC50(83.5μg/ml)。两种多肽都能通过下调MMP-2，上调TIMP-2的表达，降低基质金属蛋白酶MMP-2的活性，降低人膀胱癌细胞T24的侵袭能力和迁移能力，且30肽作用强于27肽(P<0.01或P<0.05)。
结论：引入RGD序列的人内皮抑素30肽通过下调MMP-2的表达，上调TIMP-2的表达，降低MMP-2酶的活性，抑制人膀胱癌细胞T24的侵袭能力和迁移能力。30肽作用强于27肽。