甜瓜细菌性叶斑病的寄主范围测定、16SrDNA鉴定及西瓜细菌性果斑病菌的PCR检测

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 11次 | 上传用户:ttkuaile
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近年来,甜瓜细菌性叶斑病在新疆发生普遍,危害严重,给瓜农造成极大的损失。据2004~2005年调查,在甘肃省河西地区的西瓜、甜瓜地中有零星发生,由于该病症状与西瓜细菌性果斑病在叶片上的症状很相似,认为可能是西瓜细菌性果斑病。因此,2004~2005年对采集到的病叶经分离纯化得到纯菌株,测定了该菌株的致病性和寄主范围,用16S rDNA分子生物学方法进行了鉴定,并利用PCR技术对病瓜及病瓜种子带西瓜细菌性果斑病菌的情况进行了检测,现将结果报道如下:1甜瓜细菌性叶斑病菌Ps1、Ps2的致病性及寄主范围测定从甘肃河西、新疆阿勒泰甜瓜上分离获得的17种菌中,选择了具有代表性的2种菌株(编号Ps1、Ps2)和西瓜细菌性果斑病的标准菌株,测定其致病性和寄主范围,结果表明:甜瓜细菌性叶斑病菌与西瓜细菌性果斑病菌的寄主一致,即除可侵染葫芦科植物西瓜、黄瓜、甜瓜、西葫芦、苦瓜、冬瓜、瓠瓜、丝瓜等外,还能侵染番茄、玉米、茄子、辣椒、菜豆等非葫芦科植物,2细菌性叶斑病菌16SrDNA分子鉴定对分离到的甜瓜细菌性叶斑病的病原菌Ps1、Ps2和西瓜细菌性果斑病的标准菌株,经DNA提取,PCR扩增16S rDNA基因片断后测序,其基因序列与GenBank中报告的已知序列比较,结果表明Ps1、Ps2与已报道的Pseudomonas syringae(登录号为AF094749)、标准菌株与Acidovorax avenae subsp. citrulli(登录号为AF137505)序列同源性高达99%,基本确定了这三个菌株在系统发育学中的地位,初步确定当地甜瓜细菌性叶斑病菌主要是丁香假单胞杆菌Pseudomonas syringae (Van Hall)。3西瓜细菌性果斑病菌的PCR检测2004~2005年从甘肃、新疆、内蒙等西甜瓜主产区收集到的认为染有西瓜细菌性果斑病的甜瓜、西瓜果实和种子25份,应用西瓜细菌性果斑病菌的特异性基因序列,进行PCR检测,结果只有西瓜细菌性果斑病菌的标准菌株(Acidovorax avenae subsp.citrulli)在360bp的位置出现了特异性的条带,其余待测菌株都没有此条带产生,说明通常根据症状诊断的西瓜细菌性果斑病并不是细菌性果斑病菌为害所致,初步确定2004~2005年在甘肃和新疆甜瓜主产区很少或没有西瓜细菌性果斑病的发生。
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