龋齿是一种主要由变形链球菌（Strptococcus mutans）引起的慢性口腔疾病，其发病人群广，对人类健康及公共卫生带来了巨大的危害。变形链球菌在牙齿表面能形成菌斑并产酸因而侵蚀牙齿而致病，唾液中特异性IgA抗体能抑制菌斑形成，是防止龋坏发生的主要效应因子。因此抗龋疫苗不仅需要诱导有效的系统免疫应答，更需要诱导高效的口腔粘膜免疫应答。　　我们在前期研究中采用重组融合蛋白策略构建了既包含鞭毛素蛋白佐剂、又包含龋齿疫苗抗原PAc和GLU的重组融合蛋白疫苗。并利用大鼠模型证明融合蛋白KF-rPAc和KFD2-rPAc-Glu经鼻腔粘膜免疫能产生高效的口腔特异IgA抗体应答，有效降低患龋的程度，能预防龋病发生。本论文拟进一步研究分析融合蛋白KF-rPAc和KFD2-rPAc-Glu对于已发生龋坏的个体的免疫治疗效应。基于上述目标，我们观察分析了变形链球菌口腔接种外加致龋饲料喂养诱导大鼠龋齿发生的进展过程。结果表明，随着周龄增长，大鼠在接菌后6周开始出现6周出现釉质浅龋，8周后以牙本质浅龋为主，12周后出现牙本质中龋，16周后主要为牙本质中龋，20周出现牙本质深龋。本实验结果再现了大鼠龋坏的逐渐进展，并最终突破牙髓腔的过程。根据大鼠龋坏进展特点，我们选择开始形成牙本质中龋的时间点，即饲喂致龋性饲料喂养8周，作为龋齿疫苗首次免疫的时间点。采用初免和间隔28天的两次加强鼻腔免疫后，于接菌后140天观察分析疫苗的治疗效应。实验结果如下:　　第一，与rPAc组相比，KF-rPAc融合蛋白诱导产生更高的rPAc蛋白特异性IgG及IgA抗体，KF-rPAc组的龋齿记分同样显著低于PAc组以及阴性对照PBS组。同PBS组相比，KF-rPAc对龋齿进程的抑制率超过了50％。这说明KF-rPAc可以有效阻止龋坏进展，具有明显的治疗效应。　　第二，我们对KF-rPAc融合蛋白进行了改造，增添了抗原Glu，构建了抗龋疫苗KFD2-rPAc-Glu。并在上述大鼠模型的基础上进行了免疫效应和抗龋效应的评价。虽然KFD2-rPAc-Glu诱导产生的rPAc蛋白特异性IgG及IgA抗体低于KF-rPAc，但是其可以产生显著的Glu特异性IgG及IgA抗体。在保护效应实验中，KFD2-rPAc-Glu的保护效应也显著高于KF-rPAc，其保护率达到约90％，非常显著地抑制了龋齿的进程。　　综上所述，本论文在观察大鼠龋齿进展的基础上，建立了治疗性龋齿的大鼠模型，发现预防性疫苗KF-rPAc同样具有治疗效果;KF-rPAc进行了改造，获得了保护率达到90％左右的抗龋疫苗KFD2-rPAc-Glu.