据世界卫生组织统计，全世界育龄夫妇约有10%-15%不孕不育。由男性因素引发的不育约占50%。男性不育越来越受到人们的关注。引起男性不育原因相当复杂，与遗传、感染、内分泌等诸多因素有关。最近的研究结果显示遗传因素依然是男性生精障碍主要原因，由于遗传因素易受外界环境因素影响，使遗传因素导致男性生精障碍的机制更加复杂。现已证明，Y染色体微缺失和染色体核型异常是导致男性不育的重要遗传因素，但这两大遗传因素之间是否有关联存有争议。1976年，Tiepolo等推测Y染色体长臂远端存在控制精子发生的基因，并将其命名为无精子因子（azoospermia factor，AZF）。目前将这一区域划分为AZFa、AZFb和AZFc三个区。在男性不育领域中，将发生在这三个区域的Y染色体微缺失统称为AZF微缺失。现以AZFc区缺失率最高，而且临床表现具有多样性—从无精子症到精子计数正常但伴形态异常，对该区的研究已成为国内外Y染色体微缺失研究的难点和热点。AZFc区缺失类型包括AZFc区全缺失及AZFc区部分缺失。虽然已经证明AZF微缺失、AZFc区部分缺失与男性不育之间有关联，但是缺失类型及表型在不同人种间的差异报道不一，而且还受外界环境因素影响，尚需进一步研究。故通过研究长春地区男性不育患者AZF微缺失、AZFc区部分缺失类型及与表型关系，阐述地域性差异是否在本地区存在。研究证明，血清生殖相关激素检测有助于男性不育症的诊断，AZF微缺失的患者多伴有不同激素指标的变化，但其与生殖激素水平改变情况未成定论，哪些指标变化更能反映其相关性，更能在男性不育症中具有指导意义均有待研究。研究发现，父代有将AZF微缺失的遗传缺陷垂直传递给男性后代的风险，近年来也发现AZFc区部分缺失可通过辅助生殖技术传递给下一代，所以建议进行种植前遗传学诊断，尽量选择女婴，以切断遗传途径，减少垂直传递风险。但研究父子两代（父代未通过辅助生殖技术而正常生育后代，子代不育），探讨AZF微缺失和（或）AZFc区部分缺失在两代中的类型及临床表型报道未见。希望为男性不育患者的诊断及遗传咨询提供理论依据。本论文主要从以下五个方面进行研究：1.研究本地区男性不育人群中AZF微缺失的发生率及对表型的影响。2.研究AZF微缺失与生殖相关激素之间关系。3.研究AZF微缺失与染色体核型异常之间关系。4.研究本地区AZFc区部分缺失是否存在新缺失类型，及AZFc区部分缺失类型与男性不育之间关系。5.研究在自然生育家系中，父代及子代AZF微缺失、AZFc区部分缺失类型及生殖相关激素水平与垂直遗传之间关系。方法研究人群来自2009年8月-2011年12月到吉林大学临床医院就诊检测Y染色体微缺失的1416例患者，年龄22-44岁。另收集正常生育男性60例作为对照组，年龄24-37岁。留取研究对象的精液标本，利用精液常规检测分析精液质量；留取研究对象的外周血标本，利用染色体G显带核型分析技术分析染色体核型，PCR技术检测AZF微缺失及AZFc区部分缺失来分析遗传学特性。利用电化学发光技术检测血清生殖激素和酶联免疫分析技术检测血清抑制素B来分析内分泌水平。结果1.1416例患者行AZF微缺失检测，共122例AZF微缺失，占8.62%。在AZF微缺失患者中，单纯AZFc缺失率最高（6.78%），其次为AZFb+c缺失（1.20%）、单纯AZFb缺失（0.42%）、单纯AZFa缺失（0.14%）、AZFa+c+d缺失（0.07%）。严重少精子症患者AZF缺失率最高（17.65%），其次是无精子症（10.58%）。2.在AZF微缺失患者中，AZFc区的sY254、sY255缺失率最高，占92.62%；其次为sY152（87.70%）、sY157（69.67%）、sY134（17.21%）、sY127（16.39%）、sY143（10.66%）、sY86和sY84（2.46%）。3.122例AZF微缺失患者中共有11例呈现不连续微缺失现象，临床表现为无精子症，均为AZFb+c区不连续缺失，中间未缺失的位点均是AZFb区位点。除了不连续微缺失外的其余AZF微缺失类型以AZFc区的sY152、sY254、sY255、sY157联合缺失最常见。4. AZF微缺失患者中，无精子症组患者卵泡刺激素（FSH）水平高于对照组（P＜0.05），黄体生成素（LH）水平显著高于对照组（P＜0.01），睾酮（T）水平显著低于对照组（P＜0.01），20-29岁组抑制素B（INHB）水平显著低于对照组（P＜0.01）；严重少精子症组患者T水平显著低于对照组（P＜0.01），20-29岁组和30-44岁组INHB水平显著低于对照组（P＜0.01）；轻中度少精子症组患者LH水平显著高于对照组（P＜0.01），T水平显著低于对照组（P＜0.01），20-29岁组INHB水平显著低于对照组（P＜0.01）。其他组别项目与对照组相比，无统计学意义（P＞0.05）。5.发现6例AZF微缺失患者合并染色体核型异常，临床表现均为无精子症，从染色体类型看，有4例染色体嵌合型；从AZF微缺失类型看，4例是AZFb+c区的不连续微缺失。6.未见AZF微缺失且精液质量明确的不育组AZFc区部分缺失共有四种类型：gr/gr缺失（6.37%,78/1224），b2/b3缺失（10.05%,123/1224），b1/b3缺失（0.41%,5/1224），sY142、sY1258、sY1161、sY1197缺失（0.08%,1/1224），归属于b1/b2缺失。对照组共有两种缺失类型：gr/gr缺失（6.67%,4/60），b2/b3缺失（3.33%,2/60）。不育组内五个组别与对照组比较gr/gr缺失率和b2/b3缺失率，轻中度少精子症组和正常精液不育组b2/b3缺失率高于对照组（P＜0.05），其余组别缺失率与对照组相比，无统计学意义（P＞0.05）。7.10个家系行AZF微缺失及AZFc区部分缺失检测发现：3个家系父代未见缺失，子代是新生的缺失位点。7个家系父代有缺失，子代是扩大缺失位点。其中有一个特殊家系，父代是AZF微缺失（sY152、sY254、sY255）合并AZFc区sY1191部分缺失，自然生育了子代。子代遗传了父代的缺失位点，且扩大缺失了AZFc区位点sY157和AZFc区部分缺失位点sY1291、sY1054、sY1206。8.10个家系行生殖相关激素分析显示：子代组FSH水平显著高于对照组（P＜0.01），T水平显著低于对照组（P＜0.01），20-29岁组INHB水平显著低于对照组（P＜0.01），其余激素水平与对照组相比，无统计学意义（P＞0.05）；父代组激素水平与对照组相比，无统计学意义（P＞0.05）。结论1.本地区严重少精子症患者的AZF微缺失率最高，高于无精子症患者，两者缺失均以AZFc区微缺失率最高。严重少精子症和轻中度少精子症缺失患者均是AZFc区微缺失。而且本地区无精子症缺失患者中有不连续微缺失现象。提示AZF微缺失类型及区域可能与地域性有关。2.本研究中AZF微缺失与FSH、LH、T及INHB水平有一定相关性，如果不明原因男性不育患者生殖激素水平尤其呈现低INHB和低T水平，可能真正的原因是AZF微缺失。3.本研究结果提示，位于AZFb和AZFc区上的基因不仅与精子发生有关，可能还与Y染色体稳定性相关。AZF微缺失和染色体嵌合型可能会进一步降低精子质量。4.本地区AZFc区部分缺失导致男性不育可能存在地域性差异，AZFc区b2/b3缺失与男性不育有一定关系，gr/gr缺失可能与男性不育无关，单纯gr/gr缺失可能不是影响精子发生的风险因子。5.通过自然生育的男性后代可以新生或扩大父代的缺失范围，推测可能是遗传和环境因素的共同作用使其基因突变所致。生殖激素水平变化提示子代临床表型比父代有加重的趋势，最终影响生育能力而导致不育。