蛋白转导域(Protein transduction domains，PTDs)是长度少于30个氨基酸的多肽分子。PTDs具有穿膜功能，可以携带多种生物活性分子进入细胞。本实验室前期研究已发现一种新的来源于人源胞外SOD的C末端的PTD，简称为CS。　　 凋亡素(apoptin)是来自于鸡贫血病毒(chicken anemiavirus，CAV)的小分子蛋白质，能特异性地诱导70余种人类肿瘤细胞凋亡，对人正常细胞则无害。Apoptin的核定位对于传递凋亡信号很重要，而apoptin本身不能自主跨跃细胞膜，所以利用apoptin与PTDs融合表达，这使得外源的apoptin在胞内有效地传递。　　 本论文第一部份内容为apoptin-CS融合蛋白的可溶性表达研究。鉴于apoptin-CS融合蛋白以包涵体形式表达为主，本文采用PCR介导突变方法把CS序列中Cys219突变为Lys，成功构建apoptin-CSck-pET28a突变体重组表达载体，并在E.coli BL21(DE3)中实现高效的可溶性表达，突变后的CSck仍能保持很强的细胞转导活性，可携带EGFP蛋白进入HeLa细胞。　　 论文第二部份内容是研究CS的最小跨膜功能域，利用缺失突变的方法成功构建了5种CS突变序列与EGFP的融合表达载体：EGFP-CS1-pET28a、EGFP-CS2-pET28a、EGFP-CS3-pET28a、EGFP-CS4-pET28a、EGFP-CS(缺CS3)-pET28a。各融合表达蛋白通过Ni2+-NTA亲和层析纯化，经透析、无菌过滤后与HeLa细胞孵育12h。荧光显微镜和流式细胞术结果表明CS跨膜功能域为CS4，并进一步对CS4穿膜机理进行了初步研究，发现叠氮钠和氯化铵对其穿膜活性无影响，而肝素和正电荷的存在显著抑制了其穿膜活性；CS4穿膜活性具有时间依赖性和浓量依赖性；CS4在HeLa、B16和Bcap37细胞中的穿膜活性存在着差异，目前尚未清楚CS4是否有核定位功能。