目的:研究在高糖条件下人肾小球系膜细胞与人血管平滑肌细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK)活性、c-fos表达、人肾小球系膜细胞纤维结合蛋白(FN)分泌和细胞内游离钙离子浓度的改变,探讨糖尿病肾病与糖尿病慢性血管并发症的发病机制。方法:采用脐动脉原代培养获得人血管平滑肌细胞。人肾小球系膜细胞为已建系的细胞株。细胞进行体外培养,高糖作为刺激因素,PD98059作为MAPK特异性抑制剂,甘露醇作为渗透压对照。用同位素示踪法测定MAPK活性,ELISA法测定培养上清中纤维结合蛋白(FN)含量,免疫细胞化学方法检测c-fos表达,荧光酶标仪的方法检测细胞内游离钙离子的含量。原代培养的血管平滑肌细胞在电镜下观察其特征性的结构来鉴定。结果:高糖培养下系膜细胞内MAPK的活性、c-fos的表达升高,细胞FN分泌也增加。加入MAPK特异性抑制剂PD98059以抑制MAPK后,可阻止高糖诱导的FN分泌与c-fos表达的增加。相同渗透压的甘露醇培养条件下,细胞内的MAPK活性升高、FN的分泌量以及c-fos的表达量增多。并且同高糖组没有统计学意义上的差异。在高糖培养条件下肾小球细胞内游离钙离子的浓度升高,细胞增殖在48小时开始受到抑制。电镜下观察到在原代培养的细胞内有成束的肌丝,靠近细胞膜处有密斑和密体存在,证实确实是血管平滑肌细胞。高糖培养下人血管平滑肌细胞内MAPK活性升高、c-fos的表达增加,加入MAPK特异性抑制剂PD98059以后可以阻止高糖诱导的c-fos表达的增多。结论:高糖可增加人肾小球系膜细胞MAPK的活性与c-fos表达,促进细胞FN的分泌,且MAPK的活性同c-fos表达以及FN的分泌相关。在高糖条件下人肾小球系膜细胞的增殖抑制而胞内游离钙离子的浓度升高。同样高糖也可增加人血管平滑肌细胞MAPK活性以及c-fos的表达。并且MAPK的活性同c-fos的表达具有相关性。高糖是糖尿病慢性并发症的主要致病因素。