Caspase3基因3’端非翻译区microRNA结合位点rs1049216单核苷酸多态性与宫颈癌易感性的关系

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目的:  宫颈癌为女性生殖系统肿瘤中最为常见的恶性肿瘤之一,排在女性恶性肿瘤发病率的第三位。在我国宫颈癌发病率在女性生殖道恶性肿瘤中高居于榜首。近年来宫颈癌的发病年龄越来越趋于年轻化,严重威胁着广大女性的生命及健康。  MicroRNA是广泛存在不同物种间的内源性非编码短序列RNA,通过转录后调控其靶基因的表达而参与细胞的凋亡、增殖、分化等生理过程。microRNA几乎参与了所有调控和基因表达有关生物学过程。半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)家族在凋亡过程中是很重要的蛋白酶,其中Caspase3是最为重要的凋亡效应子。目前在国内外对Caspase3基因多态性与宫颈癌相关性的研究很少。本研究主要是探讨Caspase3基因的3端非翻译区(untranslated region UTR) microRNA结合位点rs1049216单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)与宫颈癌患者易感性的相关性。  方法:  收集宫颈癌患者及健康体检人群的外周血样本,病例组515人,健康对照组415例为研究对象,提取外周血白细胞的DNA,采用聚合酶链反应-引物引入限制性内切酶分析的方法(polymerase chain reaction-primerintroduced restriction analysis, PCR-PIRA)对Caspase3基因3-UTR的rs1049216多态性位点进行基因分型检测。  选取病例组515例宫颈鳞癌石蜡组织标本。应用免疫组化的方法判定Caspase3基因在癌组织中的蛋白表达。  所有数据应用统计学软件SPSS19.0,应用卡方检验的方法对不同组别(年龄、肿瘤分期、HPV感染、淋巴转移等)进行分层分析。P<0.05有统计学意义。  结果:  1、对照组与病例组的年龄、吸烟状况无显著差异性(P=0.16)。此外,根据婚次、产次情况等进行分析,无统计学意义(P=0.16)。而HPV感染在病例组分布频率显著高于健康对照组(P<0.0001)。  2、C/C基因型为对照,C/C、T/C基因型频率无统计学意义,(OR=1.09,95%CI=0.955-1.276,P=0.133),C/C、T/T基因频率存在差异有统计学意义(OR=0.35,95%CI=0.154-0.581,P<0.0001)。相对于C等位基因,T等位基因显著降低患宫颈鳞状细胞癌的风险(OR=0.86,95%CI=0.473-0.901,P=0.003),统计还发现不携带C等位基因(T/T)的个体患宫颈鳞状细胞癌的风险是携带C等位基因(C/C+T/C)个体的0.31倍(OR=0.31,95%CI=0.126-0.513,P<0.0001)。  3、在淋巴转移组与未转移组,以C/C基因型为对照,分别与T/C、T/T基因型进行比较,两组基因型频率均无明显差异(P=0.41;P=0.25)。  4、Caspase3蛋白在宫颈鳞状细胞癌组织中表达降低,免疫组化染色结果可见,阳性颗粒位于肿瘤细胞质及部分间质细胞中。Caspase3蛋白表达与rs1049216的基因型无相关性。  结论:  1、Caspase3基因的3端非翻译区microRNA结合位点rs1049216SNP与宫颈鳞状细胞癌易感性的关联性,与C/C基因型相比,携带T/T基因型可能降低宫颈鳞状细胞癌的发病风险,且携带T等位基因可能对宫颈鳞状细胞癌的遗传易感性具有保护效应,可能与肿瘤分期及妇科肿瘤家族史有关。  2、Caspase3基因的3端非翻译区microRNA结合位点rs1049216SNP与宫颈鳞状细胞癌淋巴转移无相关性。  3、Caspase3蛋白在三种基因型的宫颈鳞状细胞癌中表达无差异。
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