【摘 要】
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背景和目的:癌细胞的能量代谢重编程被认为是癌症的标志,其中脂质代谢在结直肠癌的细胞代谢和肿瘤生长中起着重要作用。雌激素相关受体α（Estrogen-related receptor alpha,ERRα）参与调控肿瘤能量代谢的靶基因,但在结直肠癌中的代谢调控机制尚不明确。本研究旨在探索ERRα调控结直肠癌临床恶性表型的相关机制。方法:1.在癌细胞系百科全书和GEO数据库中获取结直肠癌细胞ERRα的
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背景和目的:癌细胞的能量代谢重编程被认为是癌症的标志,其中脂质代谢在结直肠癌的细胞代谢和肿瘤生长中起着重要作用。雌激素相关受体α（Estrogen-related receptor alpha,ERRα）参与调控肿瘤能量代谢的靶基因,但在结直肠癌中的代谢调控机制尚不明确。本研究旨在探索ERRα调控结直肠癌临床恶性表型的相关机制。方法:1.在癌细胞系百科全书和GEO数据库中获取结直肠癌细胞ERRα的表达数据,分析其在结直肠癌细胞和正常肠上皮细胞中的表达差异。2.收集经病理证实的结直肠癌组织及相应临床数据,共104例,通过免疫组化分析ERRα在结直肠癌与相应癌旁组织中的表达差异,并结合临床数据分析ERRα表达与临床病理特征的相关性。3.使用si RNA转染结直肠癌细胞,通过实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative PCR,q PCR）和western blot检测ERRα表达水平。4.通过CCK-8细胞增殖实验、Transwell细胞迁移实验探究ERRα低表达的结直肠癌细胞功能变化。5.尼罗红染色评估ERRα低表达与正常结直肠癌细胞内脂滴含量。6.对104例结直肠癌患者进行随访,分析ERRα表达与患者生存期之间的相关性。结果:1.GEO数据库单细胞测序数据分析提示ERRα在结直肠癌细胞系中显著高表达。2.免疫组化染色结果显示,ERRα在结直肠癌组织胞核中染色评分为0.76±0.07,相应癌旁组织染色评分为0.60±0.04,结直肠癌组织胞核中染色评分显著高于癌旁（P＜0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小、分级、远处转移等临床病理特征无明显相关性,与淋巴结转移和TMN分期呈负相关（P＜0.05）。3.CCK-8细胞增殖实验结果显示,HCT116细胞系中,分别培养24h、48h、72h、96h,ERRα低表达组细胞增殖率分别为1.17±0.25、2.72±0.26、5.58±0.77、8.08±0.62,对照组细胞增殖率分别为1.22±0.01、2.92±0.35、6.09±0.66、10.03±0.96,ERRα低表达组细胞增殖率显著低于对照组（P＜0.01）。DLD-1细胞系中,分别培养24h、48h、72h、96h,ERRα低表达组细胞增殖率分别为2.35±0.09、5.65±0.09、12.80±0.59、16.75±0.51,对照组细胞增殖率分别为3.18±0.15、6.40±0.32、13.81±0.45、18.33±0.54,ERRα低表达组细胞增殖率显著低于对照组（P＜0.0001）。4.Transwell细胞迁移实验结果显示HCT116细胞系中,ERRα低表达组迁移细胞数为7±1.48个/视野,对照组为60±2.55个/视野,ERRα低表达组迁移细胞数显著低于对照组（P＜0.0001）。DLD-1细胞系中,ERRα低表达组迁移细胞数为51±11.19个/视野,对照组为505±17.6个/视野,ERRα低表达组迁移细胞数显著低于对照组（P＜0.0001）。5.ERRα低表达的结直肠癌细胞内脂滴含量少于对照组。6.结直肠癌组织中ERRα高表达的患者平均总生存期为72.23±5.62月,低表达患者平均总生存期为50.56±5.50月,ERRα高表达患者的平均总生存期显著长于低表达患者（P＜0.01）。结论:1.ERRα在结直肠癌细胞和组织中高表达。2.ERRα调节脂质代谢,促进结直肠癌细胞增殖、迁移。3.结直肠癌组织ERRα高表达的患者总生存期长,提示ERRα在致癌过程中作用的复杂性,其具体的分子机制仍有待进一步研究。
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