异尖线虫病属于海洋自然疫源性疾病，大量存在于海洋动物中，其病原异尖线虫存在于世界各大水域中。人异尖线虫病主要是由于食入含有异尖线虫科某些种的活的第三期幼虫引起的。到目前为止，可感染人的异尖线虫主要包括6种，即典型异尖线虫(Anisakis typica)、简单异尖线虫(Anisakis simplex s.s.)、对盲囊线虫(Contracaccum spp.)、宫脂线虫(Hysterothylacium spp.)、抹香鲸异尖线虫(Anisakis physeteris)和拟地新线虫(Pseudoterranova spp.)，异尖线虫病已成为重要的食源性人兽共患寄生虫病，在1993年我国将异尖线虫病列入了《中华人民共和国禁止进境的动物传染病、寄生虫病名录》。我国是一个海水鱼消费大国，因此对异尖线虫进行准确的种类鉴定不仅是从事异尖线虫研究的前提和基础，也对防治人和动物的异尖线虫病具有重要意义。 传统的寄生虫虫种的鉴定主要是依据其形态学特征，但是此法具有很大的局限性，这就需要有新的方法来弥补这些传统方法的不足，在众多的新方法中，分子生物学方法对于寄生虫种类的鉴定，具有无可比拟的优势。本论文的研究目有两个：第一，对广州黄沙市场市售海水鱼类以及广州口岸提供的从印度尼西亚、泰国和加拿大三个国家进口的海鱼异尖线虫幼虫感染情况进行调查；第二，建立一套可用于对异尖线虫种类做出快速、准确鉴定的特异PCR检测方法，并用于对第一部分检出的异尖线虫进行鉴定；第三，对无法鉴定的异尖线虫样品进行测序和序列分析，进行鉴定。 首先通过剖检，我们对广州黄沙海鱼市场的市售海水鱼类48种共208条的异尖线虫幼虫感染情况进行了调查，结果发现感染异尖线虫幼虫的海鱼共有8种，占总鱼种数的16.7％，感染鱼共16条，占总鱼数的7.7％。从印度尼西亚、加拿大和泰国的进口的所有10种海鱼均有不同程度的感染，感染率为12.5％～100％，感染强度的变化也很大，最多的一条鱼中检出的异尖线虫达到百条以上，这些海鱼检出异尖线虫的部位主要包括肠系膜、卵巢、肝、肠和心脏的表面以及腹腔中。在本次调查中，我们发现人们日常比较喜欢的海鱼如大黄鱼、高丽马加鲭、金线鱼、女苦鱼、地鱼和墨鱼等鱼类的感染很严重，因此，相关部门和人们应加强防范异尖线虫和异尖线虫病的意识。 通过对A. simplex(s.s)，A.typica，Hysterothylacium sp.，A. pegreffii, Hysterothylacium aduncum和Contracaccum osculatum已发表的核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列进行比对，利用分子生物学软件设计出针对每种异尖线虫序列的特异性引物CQ1-CQ6，并对特异PCR反应的Mg2+浓度、退火温度和反应循环数进行了优化，优化后的Mg2+浓度为3 mM，退火温度为55℃，反应循环数为35。随后我们又对每对特异引物对应的PCR反应体系的敏感性、特异性进行了研究，结果发现6对引物特异PCR反应体系的敏感性为0.5ng-1ng，特异性好，不扩增其它对照线虫的DNA。对143条异尖线虫提取DNA，利用建立的特异PCR方法对各个样品进行了鉴定，分别代表上述6种异尖线虫。随机挑选每对特异引物扩增的异尖线虫样品的PCR产物，进行测序及序列分析，结果进一步证明了我们设计的特异引物的特异性。 本研究结果表明，目前感染国内外海鱼的异尖线虫主要包括典型异尖线虫，简单异尖线虫，对盲囊线虫和宫脂线虫，区域不同感染的情况也不一样，主要表现在感染率上。本研究首次对广州海鱼市场和广州口岸抽检的海鱼的异尖线虫幼虫感染情况进行了调查，在此基础上建立了用于异尖线虫虫种鉴定的特异PCR方法，为未知样品的快速鉴定提供了定种方法，可应用于检验检疫部门，本研究结果为对异尖线虫的进一步研究奠定了基础。