三种眼刺激毒性体外替代试验方法的建立及在化妆品安全性评价中的应用研究

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  研究目的:建立鸡胚尿囊膜绒毛膜试验(HET-CAM)、鸡胚尿囊膜绒毛膜苔盼蓝染色试验(CAM-TBS)和荧光素漏出试验(FLT)三种体外试验方法并初步评价这三种实验方法在化妆品安全性评价中替代Draize试验的可能性。 材料与方法:1、鸡胚尿囊膜绒毛膜试验(HET-CAM). 二、鸡胚尿囊膜绒毛膜苔盼蓝染色试验(CAM-TBS). 三、荧光素漏出试验(FLT).    结论:一、本次研究成功建立HET-CAM、CAM-TBS和FLT试验方法。二、与动物试验刺激分级结果相比,这三种体外实验方法均获得较高的等级相关性、分级一致性和结果的再现性。三、HET-CAM、CAM-TBS和FLT三者之间也获得较高的分级一致性。对于Draize试验评判的无/轻刺激物和中刺激物,这3种体外实验的分级与Draize试验基本一致;对于重/极重刺激物,FLT较好;三种方法评判能力相对较差的物质阳性参考物主要是溶解度较小的物质,而化妆品主要集中在洗发剂类。四、三种试验方法在一定程度上可用作眼刺激评价程序中的筛查试验,特别是对于无/轻刺激物完全可以使用这三种方法进行初检,对于化妆品及其组成原料成分刺激性的评价也可以用作筛查试验。但由于有色物质可以对CAM染色,故HET-CAM不适于分析有色物质。五、以CAM为试验材料的HET-CAM和CAM-TBS方法具有快速、灵敏、简单和廉价的优点,不需要特殊仪器,并符合替代动物试验的“3R”原则,在实际工作中有进一步推广应用的价值。
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