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目的:肾细胞癌(Renal cell carcinoma, RCC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,发病率居泌尿系统肿瘤的第二位,其中以肾透明细胞癌(Renal clear cell carcinoma, RCCC)最为常见。近年来肾癌的发病率逐渐上升,且发病呈年轻化趋势。由于肾癌发病隐匿,早期未引起患者重视和及时就诊,致使病情延误,严重影响患者的生存率及生活质量,而癌细胞转移是导致患者死亡的重要因素,此过程包括癌细胞脱离原发灶、浸润周边组织、进入循环系统和淋巴系统、转移到远处器官增殖形成转移灶。肾癌的发病机理目前尚未明了,为降低肾癌的发病率和死亡率就要对其发病机制进行研究。本项研究以肾透明细胞癌为研究对象,探讨转化生长因子β受体Ⅰ、Ⅱ(TβRⅠ、Ⅱ)在肾透明细胞癌中的甲基化状态及其蛋白表达,进一步了解TβRⅠ和TβRⅡ在肾透明细胞癌发生、发展、浸润、转移中的作用及二者之间的相互关系,寻求潜在的具有临床意义的诊疗指标,从而为肾透明细胞癌的发病机制,基因治疗及临床预后等方面提供新的理论和试验依据。方法:1.应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR, MSP)技术检测43例肾透明细胞癌组织,43例癌旁正常组织中TβRⅠ、Ⅱ基因的甲基化状况。2.应用免疫组织化学(immuno–histochemistry, IHC)P-V法检测40例肾透明细胞癌组织,28例癌旁正常组织中TβRⅠ、Ⅱ基因的蛋白表达情况。3.运用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学分析。结果:1.甲基化状态:1.1 TβRⅠ基因在RCCC组及癌旁正常组中的甲基化率分别为51.2%(22/43)和39.5%(17/43),两组的甲基化率差异无统计学意义(P>0.05);在肾透明细胞癌中,TβRⅠ基因在小于60岁组的甲基化发生率52.0% (13/25)大于60岁以上(包括60岁)组的甲基化发生率50.0%(9/18),但无显著统计学差异(P>0. 05);男性甲基化率53.8%(14/26)大于女性甲基化率47.1%(8/17),差异亦无统计学意义(P> 0.05);肿瘤直径≤7cm的TβRⅠ基因甲基化率为51.6%(16/31),肿瘤直径>7cm的甲基化率为50.0%(6/12),无统计学差异(P> 0.05);高中分化组的TβRⅠ基因甲基化率为58.8%(20/34),低分化组的甲基化率为22.2%(2/9),差异无统计学意义。1.2 TβRⅡ基因在RCCC组及癌旁正常组中的甲基化率分别为58.1%(25/43)和34.9%(15/43),差异有统计学意义,RCCC组的甲基化率显著高于癌旁正常组(P<0.05);在肾透明细胞癌中,TβRⅡ基因在小于60岁组的甲基化发生率60.0% (15/25)大于60岁以上(包括60岁)组的甲基化发生率55.6%(10/18),但无显著统计学差异(P> 0.05);男性甲基化率61.5%(16/26)大于女性甲基化率52.9%(9/17),差异亦无统计学意义(P> 0.05);肿瘤直径≤7cm的TβRⅡ基因甲基化率为54.8%(17/31),肿瘤直径>7cm的甲基化率为66.7%(8/12),无统计学差异(P> 0.05);高中分化组的TβRⅡ基因甲基化率为64.7%(22/34),低分化组的甲基化率为33.3%(3/9),差异无统计学意义。1.3两基因联合甲基化分析:20例RCCC组织中TβRⅠ、Ⅱ基因同时发生甲基化,12例癌旁正常组织中两基因同时发生甲基化,癌中同时发生率为46.5%高于癌旁正常组的27.9%,但差异无统计学意义(P >0.05)。2.蛋白表达情况:2.1应用免疫组化P-V法检测40例肾透明细胞癌组织和28例癌旁正常组织TβRⅠ蛋白表达情况,阳性表达率分别为52.5%(21/40)和89.29%(25/28),二者具有显著性差异(P<0.05)。2.2应用免疫组化P-V法检测40例肾透明细胞癌组织和28例癌旁正常组织TβRⅡ蛋白表达情况,阳性表达率分别为60.0%(24/40)和92.86%(26/28),二者具有显著性差异(P<0.05)。2.3在肾透明细胞癌组织中,TβRⅠ、TβRⅡ蛋白表达与患者年龄和性别无关(P>0.05),与肿瘤的大小和肿瘤分化程度相关(P <0.05)。3.蛋白表达与甲基化之间的关系:在TβRⅠ蛋白表达阳性的RCCC组织中,其甲基化阳性率为66.7%(14/21),在TβRⅠ蛋白表达阴性的RCCC组织中,其甲基化阳性率为36.8%(7/19),两者差异无统计学意义(P>0.05)。在TβRⅡ蛋白表达阳性的RCCC组织中,其甲基化阳性率为70.8%(17/24),在TβRⅡ蛋白表达阴性的RCCC组织中,其甲基化阳性率为43.8%(7/16),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.TβRⅠ基因在RCCC组及癌旁正常组中甲基化发生率无统计学意义,且TβRⅠ基因甲基化与临床资料无关,提示TβRⅠ基因启动子甲基化可能与RCCC的发生发展无关;TβRⅡ基因在RCCC组的甲基化发生率显著高于癌旁正常组的甲基化发生率,但TβRⅡ基因甲基化与临床资料无关,提示TβRⅡ基因启动子甲基化可能与RCCC的发生有关,而与其发展可能无关。2.两基因在RCCC组及癌旁正常组中甲基化同时发生率无统计学意义,提示两基因启动子同时发生甲基化可能亦与RCCC的发生无关。3.TβRⅠ、TβRⅡ基因蛋白表达在RCCC组均显著低于癌旁正常组,提示TβRⅠ、TβRⅡ基因蛋白表达异常可能与RCCC的发生有关。4.TβRⅠ、TβRⅡ蛋白表达与患者年龄和性别无关,与肿瘤的大小和肿瘤分化程度相关,提示TβRⅠ、TβRⅡ蛋白水平表达的下调或缺失可能参与了肾透明细胞癌的发展,浸润,转移。5.TβRⅠ、TβRⅡ甲基化阳性率在蛋白表达阳性的RCCC组织与蛋白表达阴性的RCCC组织中差异无统计学意义,提示甲基化可能不是导致蛋白表达异常的主要原因。