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蛇毒属于较为特殊的中药,其特点是成分复杂,主要成分为蛋白质,约占干重的90%—95%。因此,口服能否吸收,口服制剂是否有抗肿瘤作用以及有效剂量多少为宜,均不得而知。本课题拟采用中药血清药理学实验方法,研究动物眼镜蛇毒含药血清的体外抗肿瘤作用。1、大鼠眼镜蛇毒血清的制备成年健康SD大鼠,眼镜蛇毒(naja atra venom, NAV)40㎎/㎏灌胃,每天3次,连续灌服5天。于末次给药后1.5—2h无菌操作下心脏采血,置于离心管中,静置适当时间,待血块收缩完全后,3000转/min,离心15分钟,轻轻吸取上层的血清即为大鼠眼镜蛇毒血清(NAV Serum of Rat, NAVSR),并将其置-20℃冰箱中保存备用。2、NAVSR对K562细胞生长的影响采用台盼蓝法观察NAVSR对人慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖的影响。结果发现NAVSR可抑制K562细胞的生长,呈剂量依赖性。NAVSR作用48h,对于K562细胞的IC50为4.53%。3、NAVSR对H22、K562和B16肿瘤细胞作用的时效和量效关系采用台盼蓝法分别观察NAVSR对H22、K562和B16等肿瘤细胞增殖的影响。发现NAVSR可明显抑制上述细胞的生长,作用呈剂量依赖性和时间依赖性。4、NAV对小鼠移植性实体瘤U14和S180的作用按实体瘤接种法,取小鼠60只,体重20±2g,雌雄各半,于右腋下接种U14或S180细胞悬液,每只接种0.2 ml(细胞数约2×106个/ ml),次日,小鼠随机分四组。它们分别以小鼠NAV灌胃LD50的1/4约4.0mg/kg为高剂量组、2.0mg/kg为中剂量组、1.0mg/kg为低剂量组、生理盐水组(0.2 ml/10g),2次/日,连续10天,于末次给药后1-2h无菌条件采用摘眼球取血法取血,分离血清,此即为荷瘤小鼠眼镜蛇毒血清(NAVSM),并完整剥离瘤组织,称重。实验结果表明NAV具有抑制U14,S180移植性实体瘤的生长,NAV4.0mg/kg、2.0mg/kg和1.0mg/kg对U14的抑制率分别为94.31%、78.30%、27.05%;对S180抑制率分别为88.55%、80.12%、70.48%。