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脂溢性脱发是临床常见的毛发疾病,占总脱发人数的84.8%。目前,SA的患病率越来越高,并有年轻化趋势。此病既影响美观,又对患者身心健康不利。现代医学和祖国医学在脱发疾病方面做了大量的研究,中药育发液是霸王(广州)有限公司秘制的一种治疗脂溢性脱发的外用酊剂。本论文旨在研究中药育发液治疗脂溢性脱发的药效,并初步探讨其作用机理。 目的: 1.通过对小鼠脱毛区毛发和离体人头皮毛囊生长状况的观察评价中药育发液治疗脂溢性脱发的药效。 2.通过从现代医学研究的毛囊细胞增殖、雄性激素调节和中医活血化瘀(微循环)角度探讨中药育发液治疗脂溢性脱发的作用机理。 方法: 1.建立8%Na2S致小鼠脱毛模型,通过对脱毛区新生毛发生长状况评分、新生毛重、毛长三个指标来评价中药育发液对毛发生长的促进作用。 2.建立体外分离、培养人头皮毛囊模型,倒置显微镜下观察不同浓度中药育发液给药10d前、后离体毛囊的生长形态并进行评分;同时采用Image-Pro Plus软件测量毛囊10d的平均生长长度,比较各组差异,评价中药育发液对毛囊生长的作用。 3.采用酶消化法分别制备单层表皮角质形成细胞和人真皮成纤维细胞,中药育发液设5个不同浓度组,每组7个复孔,通过MTT法分别于给药后24 h、48h、72h、96h测定各孔在492nm处的OD值,计算中药育发液对两种细胞生长促进率的影响。 4.采用连续60d大鼠颈后皮下注射5mg/kg·d剂量的丙酸睾丸酮制备脂溢性脱发模型,同时中药育发液每天涂抹给药治疗。取各组大鼠血清,ELISA法测定血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)浓度,计算T/E2的值;取各组大鼠脱毛部分皮肤组织,检测造模区皮肤肝细胞因子(HGF)水平。 5.采用激光多普勒微循环仪测定中药育发液对正常小鼠耳廓微循环的影响、对肾上腺素所致小鼠耳廓微循环障碍的影响;采用红外测温仪测定中药育发液对8%Na2S所致脱毛小鼠脱毛区皮肤温度的影响。 成果: 1.新生毛发生长:与空白对照组比较,中药育发液各剂量组在第2d开始有明显的促毛发生长的作用(p<0.05);中药育发液低、中剂量组均可显著增加脱毛区毛发生长重量(p<0.05)和显著增加脱毛区毛长(p<0.05)。 2.离体毛囊生长:在毛囊形态评分方面,与空白对照组比较中药育发液各浓度组毛囊结构层次分明,毛根变粗,毛囊球部变大离体毛囊形态评分分值显著升高(p<0.05)。在毛囊生长长度方面,中药育发液1mg/ml浓度可显著增加毛囊的生长长度(p<0.05),其余浓度组均无显著性差异(p>0.05)。 3.表皮角质形成细胞和人真皮成纤维细胞增殖:中药育发液各浓度在给药24h后,显著促进表皮角质形成细胞生长(p<0.01),促进率均达50%。中药育发液50μg/ml、100μg/ml两个浓度在给药48h后显著促进人真皮成纤维细胞生长(p<0.05),促进率达20%。 4.性激素水平和生长因子水平:与脂脱模型组比较,中药育发液高、低剂量均可显著降低大鼠血清睾酮浓度(p<0.05),低剂量显著降低 T/E2(p<0.05),中药育发液对雌二醇浓度均无显著性影响(p>0.05);与脂脱模型组比较,中药育发液高剂量可显著提高大鼠毛囊肝细胞生长因子(HGF)水平(p<0.05)。 5.微循环影响:与空白对照组比较,中药育发液各剂量均可显著增加正常小鼠(p<0.01)和肾上腺素所致的微循环障碍小鼠耳廓血流灌注量(p<0.01);与空白对照组比较,中药育发液在给药15-120min内均有不同程度的提高皮肤表面温度的作用。 结论: 1.中药育发液可显著增加小鼠脱毛区新生毛发的重量和长度,改善毛发生长状况;显著增加人头皮毛囊的生长长度,延长离体毛囊生长周期,具有促进毛发生长的作用。 2.中药育发液在一定浓度和培养时间下对表皮角质形成细胞和人真皮成纤维细胞均具有明显的增殖作用;中药育发液可改善脂溢性模型大鼠毛发脱落情况,显著降低血清睾酮浓度,调节紊乱的T/E2值,并提高HGF水平;中药育发液可显著增加正常或微循环障碍小鼠耳廓微循环的血流量,提高皮肤表面温度,具有明显改善微循环的作用。 综上所述,中药育发液具有一定促毛发生长的效果,可以从毛囊细胞增殖、雄性激素调节和微循环角度发挥治疗脂溢性脱发的作用。